TNF-β是一种有前途用于肿瘤生物治疗的细胞因子.TNF-β缺失N端24个aa,可使它们在体外的细胞毒活性增加2～6倍,而对小鼠致死率却降低5倍,这为重组人TNF-β提供了新的思路.本文将人TNF-βN端缺失23个aa的基因序列插入到一种新型的表达载体pRSET C,使590bq的目的基因置于该载体的多聚组氨酸序列和肠激酶酶切位点序列的下游,构建了含hTNF-β基因的pRSET C(简称PC-TNF-β),再转化大肠杆菌BL21(DF3),在T_7噬菌体后动子控制下,经PTG诱导,hTNF-β得到高水平表达,经SDS-PAGE检测,在分子量约21KD处出现目的蛋白的条带,薄层扫描分析,表达产物占细菌总蛋白的18～26%.表达菌体经超声破碎,高速离心,上清经0.45μm滤膜过滤后,即为hTNF-β粗制品,经固

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本文为国家自然科学基金资助项目,批号39290752