c-erbB-2原癌基因的产物是跨膜生长因子受体的一种,具有内在酪氨激酶活性,在肿瘤细胞生长信号传递中起着重要的作用.已发现该基因的扩增或蛋白的过度表达与许多腺癌的发生、发展、转移及预后密切相关.核酶(Ribozyme)因可直接切割靶RNA并能够反复利用,而在阻断有害基因的表达方面比反义核酸更有效.本文在计算机辅助下设计了C-erbB-2特异性核酶并观察了它对靶基因体外转录产物的切割作用.主要内容如下:1.以人癌基因c-erbB-2 mRNA为靶RNA,用计算机分析显示c-erbB-2 mRNA第2428～2776位和第2820～3004位之间的二级结构相对稳定,可成为核酶攻击理想的区域.该区第2438、2477、2751位是核酶的最佳切割位点;2.在计算机辅助下,根据锤头装结构设计了针对这三个位点相应的三个核酶,分别称为RZ1、RZ2、RZ3.合成了核酸RZ1基因,测序证实合成的核酶基因序列正确;3.构建并鉴定了RZ1的体外转录载体pGEM3Z-RZ1、靶基因体外转录

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本课题为国家自然科学基金资助项目NO:39500066