CTL对肿瘤的特异性杀伤作用受到HLA的限制.在中国人群中,HLA-A2的频率最高,所以,克隆HLA-A*0201基因,构建逆转录病毒载体可以用于研究肿瘤抗原排斥基因及HLA-A*0201限制性的肿瘤抗原肽.为了克隆HLA-A*0201全长基因,我们首先抽提B淋巴母细胞(HLA-A*0201,A19)的总RNA,在HLA-A座位cDNA特异性引物两端分别加上HindⅢ,SalⅠ的酶切序列,作RT-PCR.用HindⅢ,SalⅠ同时酶切PCR产物及测序载体pBlueScript SK( /-),低熔点琼脂糖凝胶分离,切胶、纯化、连接,用TSS转化法转入XL1-Blue细菌中.接种至涂布X-gal,IPTG的含氯苄青霉素的LB平板上,挑选白色菌落,摇菌,抽

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