在肿瘤免疫治疗和基因治疗的研究中,尽管CTL的诱导至关重要,目前尚没有办法能够直接研究肿瘤特异性CTL的产生和作用.Tetramer是一种最新的能直接识别CTL上TcR的工具.我们通过设计合适的引物,在H-2K~b胞外段引人生物素特异结合多肽BSP,将H-2K~b-BSP克隆到pET21d表达载体.将表达H-2K~b和β_2微球蛋白的质粒转化E.coliBL21(DE3),分别制备H-2K~b和β_2微球蛋白的包含体.将E.G7细胞的特异性抗原多肽OVA_(257～264)、处于还原状态H-ZK~b的包含体、β_2微球蛋白的包含体三者一起通过稀释复性,复性后的多肽/H-2K~b/β_2微球蛋白聚合体经浓缩后过Sephacryl S200分子筛层析纯化.纯化后的单分子多肽/H-2K~b/β_2微球蛋白复合体在Bir A酶的作用下与生物素连接.

R730.51