[关键词]
[摘要]
设计并构建Survivin靶向的microRNA表达载体,观察其对Survivin基因的抑制作用。方法: 以Survivin为靶基因,根据pPRIME载体要求,设计针对Survivin的microRNA序列,PCR扩增获得目的片段并克隆到载体中,序列正确的载体脂质体转染Hela细胞,RTPCR和Western blotting检测其对Survivin的抑制作用。结果: 用XhoⅠ和EcoRⅠ双酶切鉴定、DNA测序证实构建的 microRNA表达载体序列正确,后者在mRNA和蛋白水平上均能明显抑制Hela细胞中Survivin的表达。结论:Survivin靶向microRNA表达载体构建成功,并能抑制靶基因的表达,为其在肿瘤基因治疗中的应用奠定了基础。
[Key word]
[Abstract]
[中图分类号]
[基金项目]
国家自然科学基金资助项目(No.30500433)