目的:采用原核表达系统重组表达抗肿瘤细胞因子——人内皮-单核活化多肽2（endothelail monocyte-activating polypeptideⅡ,EMAP-Ⅱ）,并探讨重组EMAP-Ⅱ的抗肿瘤生物学活性。方法:采用pMAL-p2x表达系统和BL-21菌株克隆表达人EMAP-Ⅱ147-312,对表达产物进行纯化。以发光底物法测定重组EMAP-Ⅱ介导人脐静脉内皮细胞ECV-304产生组织因子的活性;以流式细胞术测定其增强ECV-304细胞对于TNFα致凋亡的敏感性;以MTF法检测定其对胰腺癌SW1990细胞增殖的抑制效果。结果:测序证实EMAP-Ⅱ编码序列被正确克隆进表达载体,经诱导表达、纯化,获得重组EMAP-Ⅱ产物,每克菌体（湿重）可获得约500μg的重组蛋白,纯度为电泳纯。重组EMAP-Ⅱ在体外培养条件下可使ECV-304细胞产生TF因子;并可增强ECV-304细胞对于TNFα介导凋亡的敏感性,使凋亡率明显增加[（16.6±2.5）% vs（25.6±2.3）%,P<0.01];在一定的质量浓度（1μg/ml）下,EMAP-Ⅱ对SW1990细胞的增殖有一定抑制作用（P<0.05）。结论:本研究采用原核表达系统pMAL-p2x可表达高纯度的重组EMAP-Ⅱ,该因子具有良好的抗肿瘤生物学活性。

上海市现代生物与新药产业发展基金(No.024319115)