[关键词]
[摘要]
目的:制备Cyclin D1b蛋白C端多肽的多克隆抗体,为后续Cyclin D1b的研究奠定基础。方法: 用生物信息学方法分析Cyclin D1b蛋白的同源性、亲水性和抗原性,设计并合成Cyclin D1b C端的氨基酸序列,将合成后的多肽与钥孔血蓝蛋白(Keyhole-limpet hemocyanin,KLH) 偶联并免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体。ELISA法检测多抗效价,Western blotting检测Cyclin D1b的表达,免疫组织化学法检测该抗体的特异性与适用范围。结果:成功制备兔抗人Cyclin D1b蛋白C端多肽的多克隆抗体,ELISA法效价为1∶18 000。纯化后的抗体用于Western blotting可特异识别MCF-7细胞中的Cyclin D1b,并可用于免疫组织化学检测。结论:制备成功Cyclin D1b蛋白C端多肽的多克隆抗体,此多抗可用于Western blotting和免疫组织化学等分析。
[Key word]
[Abstract]
[中图分类号]
[基金项目]
广东省自然科学基金资助项目(No.7300385);广东省医学科学技术研究基金(No.A2009412)