2006年第13卷第5期文章目次
2006, 13(5):321-324.
DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2006.5.001
摘要:
2006, 13(5):325-328.
DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2006.5.002
摘要:
2006, 13(5):329-331.
DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2006.5.003
摘要:
2006, 13(5):332-337.
DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2006.5.004
摘要:
目的： 制备抑制食管癌细胞与肺血管内皮黏附的功能性单克隆抗体，为研究食管癌转移的靶向治疗剂打下基础。方法： 以人食管癌新鲜组织分离的肿瘤细胞免疫BALB/c小鼠，将免疫小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合后，采用活细胞荧光、ELISA、免疫组化、肿瘤细胞 内皮细胞黏附实验、Weastern bloting等方法筛选并鉴定抑制肿瘤细胞黏附的功能性单克隆抗体。结果： 共融合获得了1 134株杂交瘤克隆，在能与食管癌细胞膜反应的486株克隆中，有294株与正常食管上皮不反应或低反应；筛选到15株单抗显著地抑制食管癌细胞与人正常肺血管内皮黏附，其中2株单抗识别的黏附分子相对分子质量分别为30 000和60 000。结论 ： 成功获得了多株具有抑制食管癌细胞与肺血管内皮黏附的功能性抗体，其中2株单抗具有治疗食管癌转移的潜在应用价值。
目的： 制备抑制食管癌细胞与肺血管内皮黏附的功能性单克隆抗体，为研究食管癌转移的靶向治疗剂打下基础。方法： 以人食管癌新鲜组织分离的肿瘤细胞免疫BALB/c小鼠，将免疫小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合后，采用活细胞荧光、ELISA、免疫组化、肿瘤细胞 内皮细胞黏附实验、Weastern bloting等方法筛选并鉴定抑制肿瘤细胞黏附的功能性单克隆抗体。结果： 共融合获得了1 134株杂交瘤克隆，在能与食管癌细胞膜反应的486株克隆中，有294株与正常食管上皮不反应或低反应；筛选到15株单抗显著地抑制食管癌细胞与人正常肺血管内皮黏附，其中2株单抗识别的黏附分子相对分子质量分别为30 000和60 000。结论 ： 成功获得了多株具有抑制食管癌细胞与肺血管内皮黏附的功能性抗体，其中2株单抗具有治疗食管癌转移的潜在应用价值。
2006, 13(5):338-342.
DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2006.5.005
摘要:
目的： 研究硅和玻璃片基上的三维微结构对乳腺癌MCF-7细胞生长的影响。-方法-： 采用SU-8光刻胶光刻微加工技术在硅和玻璃片基表面制造沟槽、五角星、齿轮状3种三维微结构，与乳腺癌MCF-7细胞共培养，用倒置显微镜与扫描电镜观察三维微结构对肿瘤细胞的形态、分布、生长的影响，采用MTT法分析三维微结构对肿瘤细胞增殖的影响, 用流式细胞仪分析凋亡细胞。结果： 成功制作微米尺度带有不同深宽比的沟槽、五角星、齿轮。显微镜观察显示，MCF-7细胞喜欢在微结构的深槽中生长，特别是边角部位，而微结构的顶部及周边部位细胞非常少；悬浮细胞呈圆形且较多，作为对照的硅片基表面细胞分布稀疏，轻轻晃动后，细胞上浮；而玻璃片基表面对照细胞分布浓密，呈梭形，悬浮细胞很少。MTT分析显示，随着培养时间的增加，玻璃片基与硅片基微结构中细胞增殖抑制率增加显著（P<0.05，P<0.01）。流式细胞仪分析显示，随着培养时间增加，玻璃片基与硅片基上的微结构诱导的凋亡细胞率增加显著（P<0.05，P<0.01）。结论： 在微米尺度带有不同深宽比的沟槽、五角星、齿轮微结构能够抑制MCF-7细胞的生长，并诱导细胞凋亡。此现象在肿瘤治疗方面具有潜在的应用价值。
目的： 研究硅和玻璃片基上的三维微结构对乳腺癌MCF-7细胞生长的影响。-方法-： 采用SU-8光刻胶光刻微加工技术在硅和玻璃片基表面制造沟槽、五角星、齿轮状3种三维微结构，与乳腺癌MCF-7细胞共培养，用倒置显微镜与扫描电镜观察三维微结构对肿瘤细胞的形态、分布、生长的影响，采用MTT法分析三维微结构对肿瘤细胞增殖的影响, 用流式细胞仪分析凋亡细胞。结果： 成功制作微米尺度带有不同深宽比的沟槽、五角星、齿轮。显微镜观察显示，MCF-7细胞喜欢在微结构的深槽中生长，特别是边角部位，而微结构的顶部及周边部位细胞非常少；悬浮细胞呈圆形且较多，作为对照的硅片基表面细胞分布稀疏，轻轻晃动后，细胞上浮；而玻璃片基表面对照细胞分布浓密，呈梭形，悬浮细胞很少。MTT分析显示，随着培养时间的增加，玻璃片基与硅片基微结构中细胞增殖抑制率增加显著（P<0.05，P<0.01）。流式细胞仪分析显示，随着培养时间增加，玻璃片基与硅片基上的微结构诱导的凋亡细胞率增加显著（P<0.05，P<0.01）。结论： 在微米尺度带有不同深宽比的沟槽、五角星、齿轮微结构能够抑制MCF-7细胞的生长，并诱导细胞凋亡。此现象在肿瘤治疗方面具有潜在的应用价值。
2006, 13(5):343-348.
DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2006.5.006
摘要:
目的： 利用短发夹RNA（short hairpin RNA，shRNA）表达载体逆转耐阿霉素人乳腺癌细胞株(MCF-7/AdrR)的多药耐药性（multidrug resistance，MDR）。方法： 构建2个MDR1基因shRNA表达质粒，稳定转染MCF-7/AdrR细胞。RT PCR分析MDR1基因mRNA的表达，Western blotting检测P 糖蛋白(P-gp)的表达，流式细胞术和MTT法分别检测乳腺癌细胞的凋亡和对阿霉素的敏感性，激光共聚焦荧光显微镜检测细胞内柔红霉素的稳态积累。结果： 稳定转染pSilencerTM 3.1-H1 neo MDR1-A和MDR1-B shRNA表达质粒的MCF-7/AdrR细胞，RT-PCR结果显示MDR1基因mRNA表达分别减少到37.6%和280%，Western blotting结果显示P-gp表达被明显而特异地抑制。转染细胞对阿霉素的耐药性由162倍分别减低到108倍和50倍，并且MDR1 shRNA表达质粒增加MCF-7/AdrR细胞内柔红霉素的积累。MDR1 shRNA表达质粒和阿霉素联合应用可诱导MCF-7/AdrR细胞的凋亡。 结论： shRNA表达质粒有效地逆转多药耐药，使耐药的肿瘤细胞恢复对化疗药物的敏感性。
目的： 利用短发夹RNA（short hairpin RNA，shRNA）表达载体逆转耐阿霉素人乳腺癌细胞株(MCF-7/AdrR)的多药耐药性（multidrug resistance，MDR）。方法： 构建2个MDR1基因shRNA表达质粒，稳定转染MCF-7/AdrR细胞。RT PCR分析MDR1基因mRNA的表达，Western blotting检测P 糖蛋白(P-gp)的表达，流式细胞术和MTT法分别检测乳腺癌细胞的凋亡和对阿霉素的敏感性，激光共聚焦荧光显微镜检测细胞内柔红霉素的稳态积累。结果： 稳定转染pSilencerTM 3.1-H1 neo MDR1-A和MDR1-B shRNA表达质粒的MCF-7/AdrR细胞，RT-PCR结果显示MDR1基因mRNA表达分别减少到37.6%和280%，Western blotting结果显示P-gp表达被明显而特异地抑制。转染细胞对阿霉素的耐药性由162倍分别减低到108倍和50倍，并且MDR1 shRNA表达质粒增加MCF-7/AdrR细胞内柔红霉素的积累。MDR1 shRNA表达质粒和阿霉素联合应用可诱导MCF-7/AdrR细胞的凋亡。 结论： shRNA表达质粒有效地逆转多药耐药，使耐药的肿瘤细胞恢复对化疗药物的敏感性。
2006, 13(5):349-352.
DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2006.5.007
摘要:
目的： 探讨HLAⅠ类分子及MHCⅠ类链相关分子(MICA/MICB)在人鼻咽癌细胞株CNE2及多药耐药细胞株CNE2/DDP的表达及其对NK细胞杀伤活性的影响。方法： 流式细胞仪检测CNE2和CNE2/DDP细胞表面HLA Ⅰ类分子和MICA/MICB的表达情况；LDH释放法测定3例健康者的NK细胞在不同效靶比时对CNE2、CNE2/DDP细胞的杀伤活性；效靶比10∶1时，用抗HLAⅠ类分子单抗(W6/32)和抗MICA/MICB单抗(BAMO-1)分别封闭HLAⅠ类分子和MICA/MICB，观察NK细胞杀伤CNE2、CNE2/DDP细胞活性的变化。结果： CNE2/DDP细胞表面HLA Ⅰ类分子和MICA/MICB的表达均较CNE2细胞明显减少(Ｐ<0.01)。NK细胞对CNE2、CNE2/DDP细胞的杀伤活性在效靶比5∶1时分别是(9.37±2.14) %、(4.37±063 )%;效靶比10∶1时分别是(27.14±1.82)%、(15.79±2.87)%;效靶比20∶1时分别是(36.40±4.28)%、(26.20±418)%;效靶比30:1时分别是(54.67±2.80)% 、(40.29±2.73)%。各效靶比时NK细胞对CNE2、CNE2/DDP细胞的杀伤活性与HLAⅠ类分子和MICA/MICB相关，NK细胞对CNE2/DDP细胞的杀伤活性明显低于CNE2细胞(Ｐ<0.01)。效靶比10∶1时，W6/32明显增强NK细胞对CNE2、CNE2/DDP细胞的杀伤活性(Ｐ<0.01)，BAMO 1明显抑制NK细胞对CNE2、CNE2/DDP细胞的杀伤活性(Ｐ<0.01)。结论： HLA Ⅰ类分子和MICA/MICB在CNE2、CNE2/DDP的表达差异影响着NK细胞的杀伤活性，MICA/MICB在多药耐药肿瘤细胞的低表达导致耐药肿瘤细胞对NK细胞杀伤敏感性下降。
目的： 探讨HLAⅠ类分子及MHCⅠ类链相关分子(MICA/MICB)在人鼻咽癌细胞株CNE2及多药耐药细胞株CNE2/DDP的表达及其对NK细胞杀伤活性的影响。方法： 流式细胞仪检测CNE2和CNE2/DDP细胞表面HLA Ⅰ类分子和MICA/MICB的表达情况；LDH释放法测定3例健康者的NK细胞在不同效靶比时对CNE2、CNE2/DDP细胞的杀伤活性；效靶比10∶1时，用抗HLAⅠ类分子单抗(W6/32)和抗MICA/MICB单抗(BAMO-1)分别封闭HLAⅠ类分子和MICA/MICB，观察NK细胞杀伤CNE2、CNE2/DDP细胞活性的变化。结果： CNE2/DDP细胞表面HLA Ⅰ类分子和MICA/MICB的表达均较CNE2细胞明显减少(Ｐ<0.01)。NK细胞对CNE2、CNE2/DDP细胞的杀伤活性在效靶比5∶1时分别是(9.37±2.14) %、(4.37±063 )%;效靶比10∶1时分别是(27.14±1.82)%、(15.79±2.87)%;效靶比20∶1时分别是(36.40±4.28)%、(26.20±418)%;效靶比30:1时分别是(54.67±2.80)% 、(40.29±2.73)%。各效靶比时NK细胞对CNE2、CNE2/DDP细胞的杀伤活性与HLAⅠ类分子和MICA/MICB相关，NK细胞对CNE2/DDP细胞的杀伤活性明显低于CNE2细胞(Ｐ<0.01)。效靶比10∶1时，W6/32明显增强NK细胞对CNE2、CNE2/DDP细胞的杀伤活性(Ｐ<0.01)，BAMO 1明显抑制NK细胞对CNE2、CNE2/DDP细胞的杀伤活性(Ｐ<0.01)。结论： HLA Ⅰ类分子和MICA/MICB在CNE2、CNE2/DDP的表达差异影响着NK细胞的杀伤活性，MICA/MICB在多药耐药肿瘤细胞的低表达导致耐药肿瘤细胞对NK细胞杀伤敏感性下降。
2006, 13(5):353-357.
DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2006.5.008
摘要:
目的： 筛选人卵巢癌差异表达基因2(differentially expressed in ovarian cancer 2, DOC-2)氨基端磷酸酪氨酸作用结构域PID (nDOC 2)的相互作用蛋白质，为研究DOC-2作用的信号通路提供线索。方法： 将含有人DOC-2氨基端PID结构域cDNA的片段插入酵母表达载体pGBKT7中构建诱饵质粒，转化酵母菌AH109并在其内表达，然后转化人胎脑cDNA文库，在营养缺陷培养基和X α 半乳糖苷酶（X-α-gal）上进行双重筛选阳性克隆，PCR扩增出目的片段并测序，进行生物学分析，寻找与DOC-2氨基端PID结构域蛋白相互作用的蛋白质。结果： 经过扩增和筛选胎脑cDNA文库，排除假阳性克隆，得到21个侯选阳性克隆，其中3个克隆进行了序列分析，它们是：Amyloid beta (A4) precursor-like protein 1(APLP1)、TGFβⅢ型受体的部分mRNA和protocadherin gamma subfamily C 3 (PCDHGC3)。结论： 获得的3个基因编码的蛋白可能参与了DOC 2的信号转导通路，为研究DOC-2在卵巢癌基因治疗中的作用提供了新的思路。
目的： 筛选人卵巢癌差异表达基因2(differentially expressed in ovarian cancer 2, DOC-2)氨基端磷酸酪氨酸作用结构域PID (nDOC 2)的相互作用蛋白质，为研究DOC-2作用的信号通路提供线索。方法： 将含有人DOC-2氨基端PID结构域cDNA的片段插入酵母表达载体pGBKT7中构建诱饵质粒，转化酵母菌AH109并在其内表达，然后转化人胎脑cDNA文库，在营养缺陷培养基和X α 半乳糖苷酶（X-α-gal）上进行双重筛选阳性克隆，PCR扩增出目的片段并测序，进行生物学分析，寻找与DOC-2氨基端PID结构域蛋白相互作用的蛋白质。结果： 经过扩增和筛选胎脑cDNA文库，排除假阳性克隆，得到21个侯选阳性克隆，其中3个克隆进行了序列分析，它们是：Amyloid beta (A4) precursor-like protein 1(APLP1)、TGFβⅢ型受体的部分mRNA和protocadherin gamma subfamily C 3 (PCDHGC3)。结论： 获得的3个基因编码的蛋白可能参与了DOC 2的信号转导通路，为研究DOC-2在卵巢癌基因治疗中的作用提供了新的思路。
2006, 13(5):358-361.
DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2006.5.009
摘要:
目的： 构建具有肝脏靶向性的乙型肝炎病毒衣壳基因转移载体。方法: 采用PEG 8 000病毒浓缩法提取HepG 2.2.15细胞上清液中的乙型肝炎病毒，用β 丙内酯法制备乙型肝炎病毒衣壳，用它包裹5.3kb的绿色荧光蛋白质粒以测试其装载能力，并用ELISA法、PCR法、SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳、透射电镜等对它进行定量、定性研究，最后将其转染HepG 2细胞，通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况，通过流式细胞仪检测细胞发光率。结果: 制备的乙型肝炎病毒衣壳载体保留病毒衣壳的表面蛋白HBsAg+pre S1+pre S2，无病毒DNA；该载体对绿色荧光蛋白质粒较高装载容量，装载绿色荧光蛋白质粒后在肝癌细胞中有很高的转移效率，并能实现高表达。结论: 采用PEG 8 000病毒浓缩法、β 丙内酯法可从HepG2215细胞上清液中制备乙型肝炎病毒衣壳基因转移载体，该载体具有良好的生物学功能。
目的： 构建具有肝脏靶向性的乙型肝炎病毒衣壳基因转移载体。方法: 采用PEG 8 000病毒浓缩法提取HepG 2.2.15细胞上清液中的乙型肝炎病毒，用β 丙内酯法制备乙型肝炎病毒衣壳，用它包裹5.3kb的绿色荧光蛋白质粒以测试其装载能力，并用ELISA法、PCR法、SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳、透射电镜等对它进行定量、定性研究，最后将其转染HepG 2细胞，通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况，通过流式细胞仪检测细胞发光率。结果: 制备的乙型肝炎病毒衣壳载体保留病毒衣壳的表面蛋白HBsAg+pre S1+pre S2，无病毒DNA；该载体对绿色荧光蛋白质粒较高装载容量，装载绿色荧光蛋白质粒后在肝癌细胞中有很高的转移效率，并能实现高表达。结论: 采用PEG 8 000病毒浓缩法、β 丙内酯法可从HepG2215细胞上清液中制备乙型肝炎病毒衣壳基因转移载体，该载体具有良好的生物学功能。
2006, 13(5):362-366.
DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2006.5.010
摘要:
目的： 观察抗肝癌重组单链免疫毒素hdsFv-RC-RNase对荷人肝癌裸鼠移植瘤的导向治疗作用,并探讨其临床应用价值。方法： 将原核表达载体TIG-hdsFv-RC-RNase转化E.coli BL21（DE3）plys中，利用IPTG大量诱导表达抗肝癌hdsFv-RC-RNase重组单链免疫毒素。表达产物在非变性条件下经Ni-NTA Agarose亲合层析法纯化并体外复性，利用细胞ELISA法检测其特异性结合体外培养的人肝癌细胞的免疫活性。建立荷人肝癌裸鼠移植瘤动物模型，初步评估其对荷人肝癌裸鼠移植瘤的导向治疗作用。结果： 工程菌经IPTG诱导后，出现一条相对分子质量约为41 000的新生蛋白带，且主要以可溶性形式表达。纯化后表达产物的纯度达到基本均一。细胞ELISA检测结果显示，纯化产物复性后能够与体外培养的人肝癌细胞特异性结合，而对正常肝细胞的结合能力非常弱，两者具有非常显著的差异﹙P＜0.01）。导向治疗结果表明，其对荷人肝癌裸鼠移植瘤治疗有效率为100%，与生理盐水组相比具有非常显著的差异（P＜0.01），抑瘤率达到79.38%。结论： 成功获得了特异性强的有活性的抗肝癌重组单链免疫毒素hdsFv-RC-RNase，其对荷人肝癌裸鼠移植瘤具有一定的导向治疗作用，可能成为抗肝癌导向治疗药物。
目的： 观察抗肝癌重组单链免疫毒素hdsFv-RC-RNase对荷人肝癌裸鼠移植瘤的导向治疗作用,并探讨其临床应用价值。方法： 将原核表达载体TIG-hdsFv-RC-RNase转化E.coli BL21（DE3）plys中，利用IPTG大量诱导表达抗肝癌hdsFv-RC-RNase重组单链免疫毒素。表达产物在非变性条件下经Ni-NTA Agarose亲合层析法纯化并体外复性，利用细胞ELISA法检测其特异性结合体外培养的人肝癌细胞的免疫活性。建立荷人肝癌裸鼠移植瘤动物模型，初步评估其对荷人肝癌裸鼠移植瘤的导向治疗作用。结果： 工程菌经IPTG诱导后，出现一条相对分子质量约为41 000的新生蛋白带，且主要以可溶性形式表达。纯化后表达产物的纯度达到基本均一。细胞ELISA检测结果显示，纯化产物复性后能够与体外培养的人肝癌细胞特异性结合，而对正常肝细胞的结合能力非常弱，两者具有非常显著的差异﹙P＜0.01）。导向治疗结果表明，其对荷人肝癌裸鼠移植瘤治疗有效率为100%，与生理盐水组相比具有非常显著的差异（P＜0.01），抑瘤率达到79.38%。结论： 成功获得了特异性强的有活性的抗肝癌重组单链免疫毒素hdsFv-RC-RNase，其对荷人肝癌裸鼠移植瘤具有一定的导向治疗作用，可能成为抗肝癌导向治疗药物。
2006, 13(5):367-370.
DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2006.5.011
摘要:
目的： 利用小分子干扰RNA(siRNA)技术抑制人直肠癌Colo320细胞c-my基因的表达，探讨c-myc基因在人直肠癌Colo320细胞中的作用。方法： 设计人直肠癌Colo320细胞基因特异性小分子干扰RNA，用体外转录方法合成人直肠癌Colo320细胞的小分子干扰RNA并转染该细胞,培养48～96 h后，收集细胞RNA,应用实时荧光定量PCR方法检测转染细胞中c-myc基因mRNA水平变化,Western blotting检测c-myc表达的蛋白,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和集落形成试验检测细胞增殖活性。结果： 转染siRNA后,与对照组相比，实验组pGensil-c-myc-1、2、3、4的c-myc基因mRNA水平明显降低,c-myc的蛋白表达也明显降低。MTT法和集落形成试验检测表明，实验组的细胞增殖速率明显低于对照组。结论： 在人直肠癌Colo320 细胞中存在RNA干扰的机制,特异性siRNA能够有效地抑制c-myc基因的表达,从而抑制Colo320 细胞的增殖。
目的： 利用小分子干扰RNA(siRNA)技术抑制人直肠癌Colo320细胞c-my基因的表达，探讨c-myc基因在人直肠癌Colo320细胞中的作用。方法： 设计人直肠癌Colo320细胞基因特异性小分子干扰RNA，用体外转录方法合成人直肠癌Colo320细胞的小分子干扰RNA并转染该细胞,培养48～96 h后，收集细胞RNA,应用实时荧光定量PCR方法检测转染细胞中c-myc基因mRNA水平变化,Western blotting检测c-myc表达的蛋白,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和集落形成试验检测细胞增殖活性。结果： 转染siRNA后,与对照组相比，实验组pGensil-c-myc-1、2、3、4的c-myc基因mRNA水平明显降低,c-myc的蛋白表达也明显降低。MTT法和集落形成试验检测表明，实验组的细胞增殖速率明显低于对照组。结论： 在人直肠癌Colo320 细胞中存在RNA干扰的机制,特异性siRNA能够有效地抑制c-myc基因的表达,从而抑制Colo320 细胞的增殖。
2006, 13(5):371-375.
DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2006.5.012
摘要:
目的： 探讨吲哚胺2，3双加氧酶(indoleamine 2,3 dioxygenase，IDO)基因修饰的树突状细胞（dendritic cells，DCs）在体外对造血干细胞移植物中异基因T细胞增殖反应的抑制作用。方法： 用携带IDO基因的重组腺病毒转染BALB/c小鼠（受体）骨髓来源的DCs ，用RT PCR法检测DCs表面IDO的表达，用流式细胞术分析IDO基因修饰前后DC表型的变化，并把IDO DC与C57BL/6小鼠（供体）脾脏来源的T淋巴细胞共培养，通过混合淋巴细胞培养等方法检测异基因T细胞的特异性反应性和诱导T细胞凋亡的情况。结果： 用腺病毒载体携带的IDO基因转染DCs后，DCs可有效表达IDO，且没有影响DC的表型；IDO基因修饰的DCs可抑制异基因T细胞的增殖反应，同时可诱导异基因反应性T淋巴细胞的凋亡。结论： 在体外，IDO基因修饰的DCs可抑制移植物中异基因T淋巴细胞的增值反应。移植用该种方法处理过的骨髓，可能会预防移植物抗宿主病(GVHD)的发生。
目的： 探讨吲哚胺2，3双加氧酶(indoleamine 2,3 dioxygenase，IDO)基因修饰的树突状细胞（dendritic cells，DCs）在体外对造血干细胞移植物中异基因T细胞增殖反应的抑制作用。方法： 用携带IDO基因的重组腺病毒转染BALB/c小鼠（受体）骨髓来源的DCs ，用RT PCR法检测DCs表面IDO的表达，用流式细胞术分析IDO基因修饰前后DC表型的变化，并把IDO DC与C57BL/6小鼠（供体）脾脏来源的T淋巴细胞共培养，通过混合淋巴细胞培养等方法检测异基因T细胞的特异性反应性和诱导T细胞凋亡的情况。结果： 用腺病毒载体携带的IDO基因转染DCs后，DCs可有效表达IDO，且没有影响DC的表型；IDO基因修饰的DCs可抑制异基因T细胞的增殖反应，同时可诱导异基因反应性T淋巴细胞的凋亡。结论： 在体外，IDO基因修饰的DCs可抑制移植物中异基因T淋巴细胞的增值反应。移植用该种方法处理过的骨髓，可能会预防移植物抗宿主病(GVHD)的发生。
2006, 13(5):376-380.
DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2006.5.013
摘要:
目的： 探讨细胞周期蛋白G基因（Cyclin G）mRNA在白血病患者中的表达及其临床意义。方法：采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)对129例白血病患者和10例正常人白细胞的Cyclin G mRNA表达进行分析。结果：(1)急性白血病（AL）组和慢性白血病（CL）组Cyclin G mRNA的表达值明显高于正常对照组（P<0.05）。但AL组和CL组的差异无显著性（P>005）。(2)AL、AML、ALL组中初治/复发亚组的Cyclin G阳性率分别为71.3%、66.7%和85.7%，均明显高于相应的缓解组（P<0.05或P<0.01）和正常对照组（P<0.01）；但各白血病缓解组与正常对照组之间无显著差异（P>0.05）。(3)Cyclin G阳性表达率在白血病初治患者的不同性别、不同年龄、不同幼稚细胞之间无显著性差异。但AL组和AML组中初治患者WBC计数>50×109/L组的Cyclin G的阳性率明显高于WBC计数≤50×109/L组。(4)初治患者中有53例Cyclin G表达阳性，其中强阳性表达患者的缓解率（51.7%）显著低于一般阳性患者的缓解率（79.1%）（P<0.05）。结论： Cyclin G在白血病患者中有异常高表达，与白血病的发生有一定联系；其异常高表达可能是白血病预后不良的因素之一。
目的： 探讨细胞周期蛋白G基因（Cyclin G）mRNA在白血病患者中的表达及其临床意义。方法：采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)对129例白血病患者和10例正常人白细胞的Cyclin G mRNA表达进行分析。结果：(1)急性白血病（AL）组和慢性白血病（CL）组Cyclin G mRNA的表达值明显高于正常对照组（P<0.05）。但AL组和CL组的差异无显著性（P>005）。(2)AL、AML、ALL组中初治/复发亚组的Cyclin G阳性率分别为71.3%、66.7%和85.7%，均明显高于相应的缓解组（P<0.05或P<0.01）和正常对照组（P<0.01）；但各白血病缓解组与正常对照组之间无显著差异（P>0.05）。(3)Cyclin G阳性表达率在白血病初治患者的不同性别、不同年龄、不同幼稚细胞之间无显著性差异。但AL组和AML组中初治患者WBC计数>50×109/L组的Cyclin G的阳性率明显高于WBC计数≤50×109/L组。(4)初治患者中有53例Cyclin G表达阳性，其中强阳性表达患者的缓解率（51.7%）显著低于一般阳性患者的缓解率（79.1%）（P<0.05）。结论： Cyclin G在白血病患者中有异常高表达，与白血病的发生有一定联系；其异常高表达可能是白血病预后不良的因素之一。
2006, 13(5):381-383.
DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2006.5.014
摘要:
目的： 探讨Ki-67抗原和P53蛋白在非霍奇金淋巴瘤（NHL）的表达及其临床意义。方法： 采用免疫组化SP方法检测52例NHL及12例淋巴结反应性增生（RH）Ki-67和P53的表达情况,结合临床及病理资料进行分析。结果： Ki-67和P53在RH中的阳性表达率非常明显低于NHL(P<0.01),侵袭性NHL表达水平明显高于惰性NHL(P<0.05);两者在NHL中的表达呈正相关。Ki 67和P53在NHL的表达与患者性别、年龄、临床分期、有无全身症状、淋巴瘤细胞来源、首发部位无关。LDH＜250 μg/L的NHL Ki-67和P53阳性表达率明显低于LDH≥250 μg/L NHL中的阳性表达率(P<0.01)。Ki-67、P53阳性表达率≥25%的NHL患者与阳性表达率<25%的NHL患者相比较，平均生存期明显缩短(P<0.05)。结论： Ki-67和P53与NHL的发生发展有关,并可为预后判断提供参考依据。
目的： 探讨Ki-67抗原和P53蛋白在非霍奇金淋巴瘤（NHL）的表达及其临床意义。方法： 采用免疫组化SP方法检测52例NHL及12例淋巴结反应性增生（RH）Ki-67和P53的表达情况,结合临床及病理资料进行分析。结果： Ki-67和P53在RH中的阳性表达率非常明显低于NHL(P<0.01),侵袭性NHL表达水平明显高于惰性NHL(P<0.05);两者在NHL中的表达呈正相关。Ki 67和P53在NHL的表达与患者性别、年龄、临床分期、有无全身症状、淋巴瘤细胞来源、首发部位无关。LDH＜250 μg/L的NHL Ki-67和P53阳性表达率明显低于LDH≥250 μg/L NHL中的阳性表达率(P<0.01)。Ki-67、P53阳性表达率≥25%的NHL患者与阳性表达率<25%的NHL患者相比较，平均生存期明显缩短(P<0.05)。结论： Ki-67和P53与NHL的发生发展有关,并可为预后判断提供参考依据。
2006, 13(5):384-386.
DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2006.5.015
摘要:
目的： 观察反应停联合VAD方案治疗难治性多发性骨髓瘤的临床疗效。方法： 将16例多发性骨髓瘤患者随机分为两组，治疗组9例采用反应停联合VAD方案，反应停起始剂量为100 mg/d，每周增加50 mg/d,最大剂量为200~400 mg/d，持续12周以上；对照组7例采用单纯VAD方案，28 d为1疗程，治疗3个疗程。结果： 治疗组总有效率为66.7%，对照组总有效率为42.9%，两组间疗效有显著性差异（P＜0.05）。治疗组出现较对照组相对明显的不良反应有便秘、失眠，对症治疗后缓解。结论： 反应停联合VAD方案治疗多发性骨髓瘤疗效明显优于单用化疗组。
目的： 观察反应停联合VAD方案治疗难治性多发性骨髓瘤的临床疗效。方法： 将16例多发性骨髓瘤患者随机分为两组，治疗组9例采用反应停联合VAD方案，反应停起始剂量为100 mg/d，每周增加50 mg/d,最大剂量为200~400 mg/d，持续12周以上；对照组7例采用单纯VAD方案，28 d为1疗程，治疗3个疗程。结果： 治疗组总有效率为66.7%，对照组总有效率为42.9%，两组间疗效有显著性差异（P＜0.05）。治疗组出现较对照组相对明显的不良反应有便秘、失眠，对症治疗后缓解。结论： 反应停联合VAD方案治疗多发性骨髓瘤疗效明显优于单用化疗组。
16 淋巴管生成与肿瘤转移
2006, 13(5):387-389.
DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2006.5.016
摘要:
淋巴结转移是肿瘤分期的重要内容和预后指标。淋巴管生成不仅参与了正常胚胎淋巴管发育、组织修复，而且在肿瘤淋巴结转移等病理状况下也具有十分重要的作用。近年来多种淋巴管内皮标记物如LYVE-1、Prox-1、Podoplanin的发现和淋巴管生成模型的建立，使得人们逐渐认识到淋巴管生成因子VEGF-C、VEGF-D的表达和分子调控，以及其受体VEGFR-3在促进肿瘤淋巴结转移过程中的地位。抗肿瘤淋巴管生成已经成为肿瘤生物治疗的新靶点，并证实阻断VEGF-C/VEGF-D/VEGFR-3信号通路可以抑制肿瘤淋巴结转移。
淋巴结转移是肿瘤分期的重要内容和预后指标。淋巴管生成不仅参与了正常胚胎淋巴管发育、组织修复，而且在肿瘤淋巴结转移等病理状况下也具有十分重要的作用。近年来多种淋巴管内皮标记物如LYVE-1、Prox-1、Podoplanin的发现和淋巴管生成模型的建立，使得人们逐渐认识到淋巴管生成因子VEGF-C、VEGF-D的表达和分子调控，以及其受体VEGFR-3在促进肿瘤淋巴结转移过程中的地位。抗肿瘤淋巴管生成已经成为肿瘤生物治疗的新靶点，并证实阻断VEGF-C/VEGF-D/VEGFR-3信号通路可以抑制肿瘤淋巴结转移。
2006, 13(5):390-392.
DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2006.5.017
摘要:
肿瘤细胞在乏氧环境中会发生一系列生物学行为的改变，包括肿瘤侵袭性和转移能力的增加，其中乏氧诱导因子 -1α（hypoxia induciactor 1α, HIF-1α）起关键作用。HIF 1α可作用于多个环节促进肿瘤转移。在细胞运动方面：肝细胞生长因子(HGF)的受体c-Met在乏氧时增加，能促进细胞活动性并通过与肝细胞生长因子结合而增加细胞的侵袭性；基质降解方面：肿瘤细胞侵袭转移能力与其产生或诱导MMPs的能力密切相关，HIF 1可引起MMPs的表达增加，进而促进恶性肿瘤的转移；细胞黏附方面：HIF-1α可通过对肿瘤细胞黏附分子表达的影响而促进肿瘤转移；血管生成方面：乏氧能引起VEGF表达的上调，在肿瘤发生早期向血管生成型转变过程中，HIF-1α介导了VEGF的上调；细胞凋亡方面：HIF 1上调凋亡抑制因子Bcl-2，抑制凋亡，从而增强肿瘤转移力。HIF-1α亦可上调凋亡抑制因子p21，从而抑制凋亡使肿瘤恶性程度增加易于转移。对HIF-1α的研究可能是治疗肿瘤、减少恶性肿瘤转移的一种新途径。
肿瘤细胞在乏氧环境中会发生一系列生物学行为的改变，包括肿瘤侵袭性和转移能力的增加，其中乏氧诱导因子 -1α（hypoxia induciactor 1α, HIF-1α）起关键作用。HIF 1α可作用于多个环节促进肿瘤转移。在细胞运动方面：肝细胞生长因子(HGF)的受体c-Met在乏氧时增加，能促进细胞活动性并通过与肝细胞生长因子结合而增加细胞的侵袭性；基质降解方面：肿瘤细胞侵袭转移能力与其产生或诱导MMPs的能力密切相关，HIF 1可引起MMPs的表达增加，进而促进恶性肿瘤的转移；细胞黏附方面：HIF-1α可通过对肿瘤细胞黏附分子表达的影响而促进肿瘤转移；血管生成方面：乏氧能引起VEGF表达的上调，在肿瘤发生早期向血管生成型转变过程中，HIF-1α介导了VEGF的上调；细胞凋亡方面：HIF 1上调凋亡抑制因子Bcl-2，抑制凋亡，从而增强肿瘤转移力。HIF-1α亦可上调凋亡抑制因子p21，从而抑制凋亡使肿瘤恶性程度增加易于转移。对HIF-1α的研究可能是治疗肿瘤、减少恶性肿瘤转移的一种新途径。
2006, 13(5):393-396.
DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2006.5.018
摘要:
目前发现血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factors, VEGFs）家族包括7个成员：VEGF-A，胎盘生长因子（placenta growth factor,PlGF)，VEGF-B，VEGF-C，VEGF-D，VEGF-E 和蛇毒VEGF(snake venom VEGF,svVEGF )；其同源受体有酪氨酸激酶受体VEGFR -1(Flt-1)、VEGFR-2(KDR)、VEGFR-3(Flt-4)等多种类型。其中，VEGF-A与VEGFR-1 和VEGFR-2结合在血管生成中起关键作用，而VEGF-C、VEGF-D与VEGFR-2、VEGFR-3结合在淋巴管生成中起关键作用。胃癌血管生成、淋巴管生成对胃癌的发生发展及转移至关重要。近年研究表明，VEGF-A在胃癌组织中高表达,并在胃癌血管生成中起关键作用；VEGF-C、 VEGF-D在胃癌组织中高表达，而在胃癌淋巴管生成中起关键作用；VEGF-A、 VEGF-C及-VEGF-D与胃癌血管转移、淋巴管转移呈正相关。因此，研究VEGFs家族成员在胃癌生长及侵袭转移中的作用及其机制，可为胃癌的抗血管、抗淋巴管治疗提供新的靶点。
目前发现血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factors, VEGFs）家族包括7个成员：VEGF-A，胎盘生长因子（placenta growth factor,PlGF)，VEGF-B，VEGF-C，VEGF-D，VEGF-E 和蛇毒VEGF(snake venom VEGF,svVEGF )；其同源受体有酪氨酸激酶受体VEGFR -1(Flt-1)、VEGFR-2(KDR)、VEGFR-3(Flt-4)等多种类型。其中，VEGF-A与VEGFR-1 和VEGFR-2结合在血管生成中起关键作用，而VEGF-C、VEGF-D与VEGFR-2、VEGFR-3结合在淋巴管生成中起关键作用。胃癌血管生成、淋巴管生成对胃癌的发生发展及转移至关重要。近年研究表明，VEGF-A在胃癌组织中高表达,并在胃癌血管生成中起关键作用；VEGF-C、 VEGF-D在胃癌组织中高表达，而在胃癌淋巴管生成中起关键作用；VEGF-A、 VEGF-C及-VEGF-D与胃癌血管转移、淋巴管转移呈正相关。因此，研究VEGFs家族成员在胃癌生长及侵袭转移中的作用及其机制，可为胃癌的抗血管、抗淋巴管治疗提供新的靶点。
2006, 13(5):397-399.
DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2006.5.019
摘要:
P27蛋白属于细胞周期调控蛋白Cip／kip家族，是细胞周期负性调节因子，在人体多种恶性肿瘤细胞增殖、分化以及细胞凋亡调控中起着非常重要的作用。MAPK和PI3K/PKB信号途径均能够介导P27的降解或失活，其表达的下调与乳腺癌的发生及进展密切相关，故可能是一种新的肿瘤标志物及肿瘤预后指标。P27在乳腺癌的化学疗法、放射治疗以及激素治疗中具有一定的应用价值。通过人工调节p27表达水平及外部干涉p27作用通路可能在乳腺癌的基因疗法中具有广阔的应用前景。
P27蛋白属于细胞周期调控蛋白Cip／kip家族，是细胞周期负性调节因子，在人体多种恶性肿瘤细胞增殖、分化以及细胞凋亡调控中起着非常重要的作用。MAPK和PI3K/PKB信号途径均能够介导P27的降解或失活，其表达的下调与乳腺癌的发生及进展密切相关，故可能是一种新的肿瘤标志物及肿瘤预后指标。P27在乳腺癌的化学疗法、放射治疗以及激素治疗中具有一定的应用价值。通过人工调节p27表达水平及外部干涉p27作用通路可能在乳腺癌的基因疗法中具有广阔的应用前景。
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- 《中国肿瘤生物治疗杂志》
- 1994年创刊
- 主办单位：中国免疫学会、中国抗癌学会
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- 电子邮箱：cjcb@biother.cn
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