2021年第28卷第10期文章目次
2021, 28(10):961-968.
摘要:
目的：探讨 lncRNA HOTTIP 对肺癌细胞增殖、凋亡及 EMT 的影响及其作用机制。方法：利用 qPCR 检测 lncRNAHOTTIP、miR-637和KLK4在肺癌SPC-A-1、正常肺上皮BEAS-2B细胞中的表达量；siRNA干扰SPC-A-1细胞中lncRNA HOTTIP的表达后，分别通过CCK-8、Transwell、流式细胞术和WB法检测SPC-A-1细胞增殖、侵袭、凋亡和EMT能力的变化。miRanda软件和双荧光素酶报告基因实验分析 lncRNA HOTTIP 和 miR-637 之间的靶向关系，RNA pull-down 实验检测 lncRNA HOTTIP 和miR-637的吸附作用，检测lncRNA HOTTIP通过miR-637对SPC-A-1细胞增殖、侵袭、凋亡和EMT的调控。利用TargetScan软件分析 miR-637 与 KLK4 的相关性，双荧光素酶报告基因实验检测 miR-637 与 KLK4 mRNA 之间的相互作用；检测 miR-637 通过KLK4 mRNA对SPC-A-1细胞增殖、侵袭、凋亡和EMT的调控。下调lncRNA HOTTIP和miR-637表达后，利用qPCR和WB检测KLK4 mRNA 和蛋白表达水平的变化。结果：与 BEAS-2B 细胞比，在 SPC-A-1 细胞中 lncRNA HOTTIP 呈高表达（P<0.01），miR-637呈低表达（P<0.01），KLK4呈高表达（P<0.01）。下调lncRNA HOTTIP后，SPC-A-1细胞增殖、侵袭与EMT能力显著减弱，细胞凋亡率显著上升（P<0.01）；lncRNA HOTTIP与miR-637具有靶向关系；下调miR-637表达后，SPC-A-1细胞增殖、侵袭与EMT能力显著上升，细胞凋亡率显著降低（P<0.01）。miR-637与 KLK4 3'UTR特异性结合。miR-637通过 KLK4显著促进了 SPC-A-1细胞增殖、侵袭与 EMT，细胞凋亡率显著上升（P<0.01）。下调 lncRNA HOTTIP 使 KLK4 表达显著降低，而下调 miR-637 可促进KLK4表达（P<0.05）。结论：上调lncRNA HOTTIP可通过miR-637/KLK4轴促进肺癌SPC-A-1细胞的增殖、侵袭与EMT而抑制癌细胞凋亡。
目的：探讨 lncRNA HOTTIP 对肺癌细胞增殖、凋亡及 EMT 的影响及其作用机制。方法：利用 qPCR 检测 lncRNAHOTTIP、miR-637和KLK4在肺癌SPC-A-1、正常肺上皮BEAS-2B细胞中的表达量；siRNA干扰SPC-A-1细胞中lncRNA HOTTIP的表达后，分别通过CCK-8、Transwell、流式细胞术和WB法检测SPC-A-1细胞增殖、侵袭、凋亡和EMT能力的变化。miRanda软件和双荧光素酶报告基因实验分析 lncRNA HOTTIP 和 miR-637 之间的靶向关系，RNA pull-down 实验检测 lncRNA HOTTIP 和miR-637的吸附作用，检测lncRNA HOTTIP通过miR-637对SPC-A-1细胞增殖、侵袭、凋亡和EMT的调控。利用TargetScan软件分析 miR-637 与 KLK4 的相关性，双荧光素酶报告基因实验检测 miR-637 与 KLK4 mRNA 之间的相互作用；检测 miR-637 通过KLK4 mRNA对SPC-A-1细胞增殖、侵袭、凋亡和EMT的调控。下调lncRNA HOTTIP和miR-637表达后，利用qPCR和WB检测KLK4 mRNA 和蛋白表达水平的变化。结果：与 BEAS-2B 细胞比，在 SPC-A-1 细胞中 lncRNA HOTTIP 呈高表达（P<0.01），miR-637呈低表达（P<0.01），KLK4呈高表达（P<0.01）。下调lncRNA HOTTIP后，SPC-A-1细胞增殖、侵袭与EMT能力显著减弱，细胞凋亡率显著上升（P<0.01）；lncRNA HOTTIP与miR-637具有靶向关系；下调miR-637表达后，SPC-A-1细胞增殖、侵袭与EMT能力显著上升，细胞凋亡率显著降低（P<0.01）。miR-637与 KLK4 3'UTR特异性结合。miR-637通过 KLK4显著促进了 SPC-A-1细胞增殖、侵袭与 EMT，细胞凋亡率显著上升（P<0.01）。下调 lncRNA HOTTIP 使 KLK4 表达显著降低，而下调 miR-637 可促进KLK4表达（P<0.05）。结论：上调lncRNA HOTTIP可通过miR-637/KLK4轴促进肺癌SPC-A-1细胞的增殖、侵袭与EMT而抑制癌细胞凋亡。
2021, 28(10):969-977.
摘要:
目的：探讨盐酸石蒜碱（lycorine hydrochloride，LH）对肝癌HCCLM3细胞恶性生物学行为的影响及其对circASH2L/ miR-124-3p轴的调控作用。方法：将HCCLM3细胞分为不同浓度LH处理组（LH-L、LH-M、LH-H组）和Con、si-NC、si-circASH2L、 LH+pcDNA、LH+pcDNA-circASH2L组；以 CCK-8法、平板克隆形成实验、流式细胞术、细胞划痕实验和 Transwell小室实验分别 检测HCCLM3细胞的增殖、克隆形成、凋亡、迁移和侵袭；qPCR法检测HCCLM3细胞中circASH2L和miR-124-3p的表达量；双荧 光素酶报告基因实验检测 circASH2L 和 miR-124-3p 的靶向关系；WB 法检测 cleaved-caspase3、cleaved-caspase9、E-cadherin、 N-cadherin蛋白表达量。结果：与Con组比较，LH不同浓度组细胞增殖抑制率升高（P<0.05），划痕愈合率与N-cadherin蛋白水平降低（P<0.05），circASH2L的表达水平降低（P<0.05），细胞增殖抑制率降低（P<0.05），克隆形成数与侵袭细胞数增多（均P<0.05），划痕愈合率与N-cadherin蛋白水平升高（均P目的：探讨盐酸石蒜碱（lycorine hydrochloride，LH）对肝癌HCCLM3细胞恶性生物学行为的影响及其对circASH2L/ miR-124-3p轴的调控作用。方法：将HCCLM3细胞分为不同浓度LH处理组（LH-L、LH-M、LH-H组）和Con、si-NC、si-circASH2L、 LH+pcDNA、LH+pcDNA-circASH2L组；以 CCK-8法、平板克隆形成实验、流式细胞术、细胞划痕实验和 Transwell小室实验分别 检测HCCLM3细胞的增殖、克隆形成、凋亡、迁移和侵袭；qPCR法检测HCCLM3细胞中circASH2L和miR-124-3p的表达量；双荧 光素酶报告基因实验检测 circASH2L 和 miR-124-3p 的靶向关系；WB 法检测 cleaved-caspase3、cleaved-caspase9、E-cadherin、 N-cadherin蛋白表达量。结果：与Con组比较，LH不同浓度组细胞增殖抑制率升高（P<0.05），凋亡率与cleaved-caspase3、cleaved-caspase9、E-cadherin 蛋白水平升高（均P<0.05），miR-124-3p 的表达水平升高（P<0.05），克隆形成数与侵袭细胞数减少（均P<0.05），划痕愈合率与N-cadherin蛋白水平降低（P<0.05），circASH2L的表达水平降低（P<0.05），且不同浓度组间比较差异有统 计学意义（P<0.05）。circASH2L可负向调控 miR-124-3p。与 si-NC 组比较，si-circASH2L组细胞增殖抑制率升高（P<0.05），凋亡 率与 cleaved-caspase3、cleaved-caspase9、E-cadherin 蛋白水平升高（均 P<0.05），划痕愈合率与 N-cadherin 蛋白水平降低（均 P<0.05），克隆形成数与侵袭细胞数减少（均 P<0.05）。与 LH+pcDNA 组比较，LH+pcDNA-circASH2L 组 miR-124-3p的表达水平 降低（P<0.05），细胞增殖抑制率降低（P<0.05），凋亡率与 cleaved-caspase3、cleaved-caspase9、E-cadherin 蛋白水平降低（均 P<0.05），克隆形成数与侵袭细胞数增多（均 P<0.05），划痕愈合率与N-cadherin蛋白水平升高（均 P<0.05）。结论：LH可通过调控 circASH2L/miR-124-3p轴来抑制肝癌细胞HCCLM3的增殖、迁移、侵袭并诱导其凋亡。
目的：探讨盐酸石蒜碱（lycorine hydrochloride，LH）对肝癌HCCLM3细胞恶性生物学行为的影响及其对circASH2L/ miR-124-3p轴的调控作用。方法：将HCCLM3细胞分为不同浓度LH处理组（LH-L、LH-M、LH-H组）和Con、si-NC、si-circASH2L、 LH+pcDNA、LH+pcDNA-circASH2L组；以 CCK-8法、平板克隆形成实验、流式细胞术、细胞划痕实验和 Transwell小室实验分别 检测HCCLM3细胞的增殖、克隆形成、凋亡、迁移和侵袭；qPCR法检测HCCLM3细胞中circASH2L和miR-124-3p的表达量；双荧 光素酶报告基因实验检测 circASH2L 和 miR-124-3p 的靶向关系；WB 法检测 cleaved-caspase3、cleaved-caspase9、E-cadherin、 N-cadherin蛋白表达量。结果：与Con组比较，LH不同浓度组细胞增殖抑制率升高（P<0.05），划痕愈合率与N-cadherin蛋白水平降低（P<0.05），circASH2L的表达水平降低（P<0.05），细胞增殖抑制率降低（P<0.05），克隆形成数与侵袭细胞数增多（均P<0.05），划痕愈合率与N-cadherin蛋白水平升高（均P目的：探讨盐酸石蒜碱（lycorine hydrochloride，LH）对肝癌HCCLM3细胞恶性生物学行为的影响及其对circASH2L/ miR-124-3p轴的调控作用。方法：将HCCLM3细胞分为不同浓度LH处理组（LH-L、LH-M、LH-H组）和Con、si-NC、si-circASH2L、 LH+pcDNA、LH+pcDNA-circASH2L组；以 CCK-8法、平板克隆形成实验、流式细胞术、细胞划痕实验和 Transwell小室实验分别 检测HCCLM3细胞的增殖、克隆形成、凋亡、迁移和侵袭；qPCR法检测HCCLM3细胞中circASH2L和miR-124-3p的表达量；双荧 光素酶报告基因实验检测 circASH2L 和 miR-124-3p 的靶向关系；WB 法检测 cleaved-caspase3、cleaved-caspase9、E-cadherin、 N-cadherin蛋白表达量。结果：与Con组比较，LH不同浓度组细胞增殖抑制率升高（P<0.05），凋亡率与cleaved-caspase3、cleaved-caspase9、E-cadherin 蛋白水平升高（均P<0.05），miR-124-3p 的表达水平升高（P<0.05），克隆形成数与侵袭细胞数减少（均P<0.05），划痕愈合率与N-cadherin蛋白水平降低（P<0.05），circASH2L的表达水平降低（P<0.05），且不同浓度组间比较差异有统 计学意义（P<0.05）。circASH2L可负向调控 miR-124-3p。与 si-NC 组比较，si-circASH2L组细胞增殖抑制率升高（P<0.05），凋亡 率与 cleaved-caspase3、cleaved-caspase9、E-cadherin 蛋白水平升高（均 P<0.05），划痕愈合率与 N-cadherin 蛋白水平降低（均 P<0.05），克隆形成数与侵袭细胞数减少（均 P<0.05）。与 LH+pcDNA 组比较，LH+pcDNA-circASH2L 组 miR-124-3p的表达水平 降低（P<0.05），细胞增殖抑制率降低（P<0.05），凋亡率与 cleaved-caspase3、cleaved-caspase9、E-cadherin 蛋白水平降低（均 P<0.05），克隆形成数与侵袭细胞数增多（均 P<0.05），划痕愈合率与N-cadherin蛋白水平升高（均 P<0.05）。结论：LH可通过调控 circASH2L/miR-124-3p轴来抑制肝癌细胞HCCLM3的增殖、迁移、侵袭并诱导其凋亡。
2021, 28(10):978-984.
摘要:
目的：探讨 miR-627-3p 在食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma，ESCC）组织中的表达及其对 ESCC细胞生物学行为的影响。方法：收集2015年1月至2015年10月河北医科大学第四医院胸外科手术切除的ESCC组织86例及对应的癌旁组织标本20例。通过qPCR法检测miR-627-3p在86例ESCC组织及癌旁组织中的表达，分析其表达与ESCC患者临床病理学指标及预后的关系；利用Kaplan-Meier Plotter在线数据库进一步分析数据库中hsa-miR-627的表达与ESCC患者预后的关系；通过qPCR法检测miR-627-3p在4株ESCC细胞系中的表达，选取表达水平最低的食管癌细胞转染miR-627-3p mimic，选取表达水平最高的ESCC细胞转染miR-627-3p inhibitor，采用CCK-8法检测细胞的增殖，采用Transwell实验检测细胞迁移和侵袭；采用 KEGG分析探讨 miR-627-3p可能介导的信号转导通路，并采用 qPCR法验证 miR-627-3p对信号通路中关键基因表达的影响。结果：miR-627-3p在 ESCC组织中的表达明显低于在癌旁组织中的表达，miR-627-3p的表达与 ESCC患者淋巴结转移和临床分期相关（均 P<0.05）；miR-627-3p高表达的 ESCC 患者的 5年生存率明显高于 miR-627-3p低表达的食管癌患者（P<0.05）。ESCC细胞系 KYSE170中 miR-627-3p表达最低，KYSE30中 miR-627-3p表达最高；在 KYSE170细胞中转染 miR-627-3p mimic后，细胞的增殖能力无明显变化（P>0.05），但细胞的迁移（P<0.05）和侵袭能力（P<0.05）显著降低；在 KYSE30 细胞中转染 miR-627-3p inhibitor 后，细胞的增殖能力无明显变化（P>0.05），但细胞的迁移（P<0.05）和侵袭能力（P<0.05）显著增高。KEGG 分析结果显示，miR-627-3p介导了多条与肿瘤相关的信号转导通路。结论：miR-627-3p在ESCC组织中的表达明显低于在癌旁组织中的表达，其低表达与ESCC患者的不良预后相关，miR-627-3p抑制ESCC细胞的迁移和侵袭，可能是通过干扰多条与肿瘤相关的信号通路发挥生物学功能。
目的：探讨 miR-627-3p 在食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma，ESCC）组织中的表达及其对 ESCC细胞生物学行为的影响。方法：收集2015年1月至2015年10月河北医科大学第四医院胸外科手术切除的ESCC组织86例及对应的癌旁组织标本20例。通过qPCR法检测miR-627-3p在86例ESCC组织及癌旁组织中的表达，分析其表达与ESCC患者临床病理学指标及预后的关系；利用Kaplan-Meier Plotter在线数据库进一步分析数据库中hsa-miR-627的表达与ESCC患者预后的关系；通过qPCR法检测miR-627-3p在4株ESCC细胞系中的表达，选取表达水平最低的食管癌细胞转染miR-627-3p mimic，选取表达水平最高的ESCC细胞转染miR-627-3p inhibitor，采用CCK-8法检测细胞的增殖，采用Transwell实验检测细胞迁移和侵袭；采用 KEGG分析探讨 miR-627-3p可能介导的信号转导通路，并采用 qPCR法验证 miR-627-3p对信号通路中关键基因表达的影响。结果：miR-627-3p在 ESCC组织中的表达明显低于在癌旁组织中的表达，miR-627-3p的表达与 ESCC患者淋巴结转移和临床分期相关（均 P<0.05）；miR-627-3p高表达的 ESCC 患者的 5年生存率明显高于 miR-627-3p低表达的食管癌患者（P<0.05）。ESCC细胞系 KYSE170中 miR-627-3p表达最低，KYSE30中 miR-627-3p表达最高；在 KYSE170细胞中转染 miR-627-3p mimic后，细胞的增殖能力无明显变化（P>0.05），但细胞的迁移（P<0.05）和侵袭能力（P<0.05）显著降低；在 KYSE30 细胞中转染 miR-627-3p inhibitor 后，细胞的增殖能力无明显变化（P>0.05），但细胞的迁移（P<0.05）和侵袭能力（P<0.05）显著增高。KEGG 分析结果显示，miR-627-3p介导了多条与肿瘤相关的信号转导通路。结论：miR-627-3p在ESCC组织中的表达明显低于在癌旁组织中的表达，其低表达与ESCC患者的不良预后相关，miR-627-3p抑制ESCC细胞的迁移和侵袭，可能是通过干扰多条与肿瘤相关的信号通路发挥生物学功能。
2021, 28(10):985-989.
摘要:
目的：探讨F框蛋白2（F-box only protein 2，FBXO2）基因在人胃癌细胞系中表达及其对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭和EMT 的影响。方法：选择胃癌细胞系 MGC-803、AGS、SGC-7901、MKN-28以及正常胃黏膜上皮细胞株 GES-1，qPCR 法检测细胞中FBXO2 mRNA表达水平。设计靶向抑制FBXO2表达的特异siRNA，并瞬时转染MGC-803细胞，转染siRNA无义序列的为阴性对照。qPCR法检测转染48 h后MGC-803细胞中FBXO2 mRNA表达水平；用MTT法、细胞划痕愈合法、Transwell小室法检测降低 FBXO2表达对细胞增殖、迁移和侵袭的影响，WB 法检测细胞中 EMT 相关蛋白 E-cadherin、N-cadherin、vimentin的表达。结果：4种胃癌细胞中FBXO2 mRNA表达水平显著高于胃黏膜上皮细胞GES-1（P<0.05或P<0.01）。与阴性对照组相比，siRNA[1]FBXO2组MGC-803细胞中FBXO2 mRNA表达下调（P<0.01），该细胞的增殖、迁移和侵袭能力受到显著抑制（P<0.05或P<0.01），E-cadherin蛋白表达明显升高（P<0.01），N-cadherin、vimentin蛋白表达显著降低（均 P<0.01）。结论：低表达的 FBXO2可抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力，该抑制作用可能与EMT过程有关。
目的：探讨F框蛋白2（F-box only protein 2，FBXO2）基因在人胃癌细胞系中表达及其对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭和EMT 的影响。方法：选择胃癌细胞系 MGC-803、AGS、SGC-7901、MKN-28以及正常胃黏膜上皮细胞株 GES-1，qPCR 法检测细胞中FBXO2 mRNA表达水平。设计靶向抑制FBXO2表达的特异siRNA，并瞬时转染MGC-803细胞，转染siRNA无义序列的为阴性对照。qPCR法检测转染48 h后MGC-803细胞中FBXO2 mRNA表达水平；用MTT法、细胞划痕愈合法、Transwell小室法检测降低 FBXO2表达对细胞增殖、迁移和侵袭的影响，WB 法检测细胞中 EMT 相关蛋白 E-cadherin、N-cadherin、vimentin的表达。结果：4种胃癌细胞中FBXO2 mRNA表达水平显著高于胃黏膜上皮细胞GES-1（P<0.05或P<0.01）。与阴性对照组相比，siRNA[1]FBXO2组MGC-803细胞中FBXO2 mRNA表达下调（P<0.01），该细胞的增殖、迁移和侵袭能力受到显著抑制（P<0.05或P<0.01），E-cadherin蛋白表达明显升高（P<0.01），N-cadherin、vimentin蛋白表达显著降低（均 P<0.01）。结论：低表达的 FBXO2可抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力，该抑制作用可能与EMT过程有关。
2021, 28(10):990-997.
摘要:
目的：寻找多发性骨髓瘤（MM）基因芯片数据集中的潜在致病基因、疾病诊断和预后相关因子并阐明其作用机制。方法：获取基因芯片数据集 GSE13591 和 Zhan Myeloma，使用 R 语言进行基因差异表达分析。对共同高表达基因进行 Meta分析，得到 P值中位秩次 TOP10基因。CCLE数据库分析 TOP10基因在各肿瘤细胞系中的 mRNA表达情况，筛选出蛋白酶体通路相关基因8（DCAF8）。cBioPortal数据库中分析DCAF8基因在各肿瘤细胞系的突变率。WB检测DCAF8蛋白在骨髓瘤细胞系中的表达情况。SPSS和Graph Pad软件分析DCAF8表达量和MM患者临床特征之间的相关性，进行受试者工作特征曲线（ROC曲线）绘制和生存分析。R语言Custer Profiler Package和Metascape数据库对DCAF8互作蛋白基因和共表达基因进行GO和KEGG功能富集分析。结果：数据集GSE13591和Zhan Myeloma的上调基因取交集得到477个共同高表达基因。在合并数据集中对上述基因进行 Meta分析，得到 P值中位秩次 TOP10基因，DCAF8在 MM细胞系中的平均表达水平最高。DCAF8基因在浆细胞骨髓瘤中的突变率位于各肿瘤细胞系的第一位。DCAF8蛋白在多种MM细胞系中的表达量显著升高（P<0.01）。DCAF8表达量与MM患者的肿瘤负荷显著正相关，1q21扩增阳性组的DCAF8的表达量显著高于1q21阴性组。ROC曲线显示DCAF8的表达水平可以很好地区分MM患者和正常人（P<0.01）。DCAF8高表达组比DCAF8低表达组中位生存时间显著缩短。蛋白互作网络显示DCAF8可与XPO1蛋白直接相互作用。GO和KEGG功能富集分析结果表明，DCAF8与蛋白酶体功能、剪切体活性、组蛋白乙酰化酶活性、RNA转运等功能相关。结论：DCAF8在MM中显著高表达，其表达水平可以很好地区分MM患者和正常人；其高表达与MM患者的生存预后显著负相关，且与1q21扩增和XPO1蛋白相关。
目的：寻找多发性骨髓瘤（MM）基因芯片数据集中的潜在致病基因、疾病诊断和预后相关因子并阐明其作用机制。方法：获取基因芯片数据集 GSE13591 和 Zhan Myeloma，使用 R 语言进行基因差异表达分析。对共同高表达基因进行 Meta分析，得到 P值中位秩次 TOP10基因。CCLE数据库分析 TOP10基因在各肿瘤细胞系中的 mRNA表达情况，筛选出蛋白酶体通路相关基因8（DCAF8）。cBioPortal数据库中分析DCAF8基因在各肿瘤细胞系的突变率。WB检测DCAF8蛋白在骨髓瘤细胞系中的表达情况。SPSS和Graph Pad软件分析DCAF8表达量和MM患者临床特征之间的相关性，进行受试者工作特征曲线（ROC曲线）绘制和生存分析。R语言Custer Profiler Package和Metascape数据库对DCAF8互作蛋白基因和共表达基因进行GO和KEGG功能富集分析。结果：数据集GSE13591和Zhan Myeloma的上调基因取交集得到477个共同高表达基因。在合并数据集中对上述基因进行 Meta分析，得到 P值中位秩次 TOP10基因，DCAF8在 MM细胞系中的平均表达水平最高。DCAF8基因在浆细胞骨髓瘤中的突变率位于各肿瘤细胞系的第一位。DCAF8蛋白在多种MM细胞系中的表达量显著升高（P<0.01）。DCAF8表达量与MM患者的肿瘤负荷显著正相关，1q21扩增阳性组的DCAF8的表达量显著高于1q21阴性组。ROC曲线显示DCAF8的表达水平可以很好地区分MM患者和正常人（P<0.01）。DCAF8高表达组比DCAF8低表达组中位生存时间显著缩短。蛋白互作网络显示DCAF8可与XPO1蛋白直接相互作用。GO和KEGG功能富集分析结果表明，DCAF8与蛋白酶体功能、剪切体活性、组蛋白乙酰化酶活性、RNA转运等功能相关。结论：DCAF8在MM中显著高表达，其表达水平可以很好地区分MM患者和正常人；其高表达与MM患者的生存预后显著负相关，且与1q21扩增和XPO1蛋白相关。
2021, 28(10):998-1004.
摘要:
目的：探讨穿膜蛋白125（transmembrane protein125，TMEM125）在肺腺癌组织与A549细胞中的表达，以及影响细胞的增殖和侵袭能力的分子机制。方法：从癌症基因组图谱（the cancer genome atlas，TCGA）数据库收集肺腺癌数据包，下载临床信息及基因表达谱数据。分析 TMEM125在肺腺癌组织中的表达及其与患者总生存期的相关性。构建 TMEM125过表达 A549细胞株，以CCK-8法、细胞划痕实验检测TMEM125过表达对肿瘤细胞的增殖和迁移能力的影响；流式细胞术检测TMEM125过表达对A549细胞的细胞周期和凋亡的影响。WB检测TMEM125过表达对下游NF-κB信号通路、凋亡蛋白的影响；免疫共沉淀法（co-immunoprecipitation，Co-IP）检 测 TMEM125 与 NF- κB 抑 制 因 子 结 合 Ras 样 2（NF- κB inhibitor interacting Ras-like 2，NKIRAS2）的相互作用。利用TNFα（10 ng/ml）处理TMEM125过表达A549细胞，CKK-8、流式细胞术及WB检测其对细胞增殖、凋亡以及NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响。去甲基化试剂地西他滨处理A549细胞，qPCR和WB检测TMEM125基因和蛋白的表达。结果：TMEM125 mRNA在肺腺癌组织中表达水平显著低于正常组织（P<0.001），启动子甲基化水平显著高于正常组织（P<0.001），并且低、中表达患者总生存期显著低于高表达患者（P<0.001）。过表达TMEM125抑制了A549细胞的增殖和迁移（P<0.01），增加细胞 G2/M 期，促进细胞凋亡（P<0.01）；过表达 TMEM125 与 NKIRAS2 相互作用，显著抑制 NF-κB 的活性（P<0.01）；地西他滨处理 A549 细胞可促进 TMEM125 表达并且抑制细胞增殖（P<0.01）。结论：启动子高甲基化水平降低了TMEM125基因表达，导致其抑制NF-κB活性功能和抑制细胞增殖的作用下降，并且降低了细胞对地西他滨的敏感性。
目的：探讨穿膜蛋白125（transmembrane protein125，TMEM125）在肺腺癌组织与A549细胞中的表达，以及影响细胞的增殖和侵袭能力的分子机制。方法：从癌症基因组图谱（the cancer genome atlas，TCGA）数据库收集肺腺癌数据包，下载临床信息及基因表达谱数据。分析 TMEM125在肺腺癌组织中的表达及其与患者总生存期的相关性。构建 TMEM125过表达 A549细胞株，以CCK-8法、细胞划痕实验检测TMEM125过表达对肿瘤细胞的增殖和迁移能力的影响；流式细胞术检测TMEM125过表达对A549细胞的细胞周期和凋亡的影响。WB检测TMEM125过表达对下游NF-κB信号通路、凋亡蛋白的影响；免疫共沉淀法（co-immunoprecipitation，Co-IP）检 测 TMEM125 与 NF- κB 抑 制 因 子 结 合 Ras 样 2（NF- κB inhibitor interacting Ras-like 2，NKIRAS2）的相互作用。利用TNFα（10 ng/ml）处理TMEM125过表达A549细胞，CKK-8、流式细胞术及WB检测其对细胞增殖、凋亡以及NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响。去甲基化试剂地西他滨处理A549细胞，qPCR和WB检测TMEM125基因和蛋白的表达。结果：TMEM125 mRNA在肺腺癌组织中表达水平显著低于正常组织（P<0.001），启动子甲基化水平显著高于正常组织（P<0.001），并且低、中表达患者总生存期显著低于高表达患者（P<0.001）。过表达TMEM125抑制了A549细胞的增殖和迁移（P<0.01），增加细胞 G2/M 期，促进细胞凋亡（P<0.01）；过表达 TMEM125 与 NKIRAS2 相互作用，显著抑制 NF-κB 的活性（P<0.01）；地西他滨处理 A549 细胞可促进 TMEM125 表达并且抑制细胞增殖（P<0.01）。结论：启动子高甲基化水平降低了TMEM125基因表达，导致其抑制NF-κB活性功能和抑制细胞增殖的作用下降，并且降低了细胞对地西他滨的敏感性。
2021, 28(10):1005-1014.
摘要:
目的：探究linc00941作为ceRNA吸附miR-203上调CC-趋化因子配体2（CC chemokine ligand 2，CCL2）的表达在食管鳞癌（esophageal squamous cell carcinoma，ESCC）中的作用机制。方法：选取南阳医学高等专科学校第一附属医院58例ESCC患者的癌组织和癌旁组织，其中，男性患者 33 例，年龄（49.3±18.6）岁，女性患者 25 例，年龄（44.6±20.7）岁。qPCR 法检测linc00941、miR-203、CCL2 在 ESCC 组织和 4 株人 ESCC 细胞系（EC9706、KYSE30、ECA109 和 TE1）以及人正常食管上皮细胞株HET-1A 细胞系中的表达。构建 linc00941-wt、linc00941-mut、CCL2-wt、CCL2-mut 质粒并分别与 miR-203 NC 或 miR-203 模拟物共转染到 293T细胞中。双荧光素酶报告基因实验验证 linc00941、miR-203、CCL2之间的相互作用。CCK-8和 Transwell实验检测细胞的增殖与侵袭能力。乳酸含量检测评价细胞的糖酵解能力。流式细胞术检测细胞的凋亡情况。糖酵解抑制剂2-DG以及linc00941共同干预ESCC细胞，以进一步观察linc00941对ESCC细胞的调控作用。结果：在ESCC组织中和细胞系中linc00941、CCL2表达均上调，miR-203表达下调（均P<0.05）。linc00941与miR-203、miR-203与CCL2的相互作用在ECA109细胞中得到证实。下调 linc00941 能够抑制 ECA109 细胞的增殖、侵袭和糖酵解，并诱导细胞凋亡，该作用被 miR-203 抑制剂部分逆转（均P<0.05）。过表达 CCL2 可以部分逆转敲减 linc00941 对 ECA109 细胞增殖、侵袭、糖酵解和凋亡的影响（均 P<0.05）。结论：linc00941能够吸附miR-203进而上调CCL2的表达，促进ESCC细胞的增殖、侵袭和糖酵解，诱导细胞凋亡。linc00941对ESCC细胞增殖、侵袭和凋亡的影响可能是通过调控糖酵解实现的。
目的：探究linc00941作为ceRNA吸附miR-203上调CC-趋化因子配体2（CC chemokine ligand 2，CCL2）的表达在食管鳞癌（esophageal squamous cell carcinoma，ESCC）中的作用机制。方法：选取南阳医学高等专科学校第一附属医院58例ESCC患者的癌组织和癌旁组织，其中，男性患者 33 例，年龄（49.3±18.6）岁，女性患者 25 例，年龄（44.6±20.7）岁。qPCR 法检测linc00941、miR-203、CCL2 在 ESCC 组织和 4 株人 ESCC 细胞系（EC9706、KYSE30、ECA109 和 TE1）以及人正常食管上皮细胞株HET-1A 细胞系中的表达。构建 linc00941-wt、linc00941-mut、CCL2-wt、CCL2-mut 质粒并分别与 miR-203 NC 或 miR-203 模拟物共转染到 293T细胞中。双荧光素酶报告基因实验验证 linc00941、miR-203、CCL2之间的相互作用。CCK-8和 Transwell实验检测细胞的增殖与侵袭能力。乳酸含量检测评价细胞的糖酵解能力。流式细胞术检测细胞的凋亡情况。糖酵解抑制剂2-DG以及linc00941共同干预ESCC细胞，以进一步观察linc00941对ESCC细胞的调控作用。结果：在ESCC组织中和细胞系中linc00941、CCL2表达均上调，miR-203表达下调（均P<0.05）。linc00941与miR-203、miR-203与CCL2的相互作用在ECA109细胞中得到证实。下调 linc00941 能够抑制 ECA109 细胞的增殖、侵袭和糖酵解，并诱导细胞凋亡，该作用被 miR-203 抑制剂部分逆转（均P<0.05）。过表达 CCL2 可以部分逆转敲减 linc00941 对 ECA109 细胞增殖、侵袭、糖酵解和凋亡的影响（均 P<0.05）。结论：linc00941能够吸附miR-203进而上调CCL2的表达，促进ESCC细胞的增殖、侵袭和糖酵解，诱导细胞凋亡。linc00941对ESCC细胞增殖、侵袭和凋亡的影响可能是通过调控糖酵解实现的。
2021, 28(10):1015-1022.
摘要:
目的：探讨 miR-183 对脑胶质瘤细胞放射敏感性的影响。方法：2020 年 10 月至 2021 年 6 月，收集秦皇岛市第一医院 40 例脑胶质瘤组织标本，对 T98G 细胞进行梯度剂量 X 射线（0、2、4、6 Gy）照射。采用 qPCR 检测 miR-183、细胞质多腺苷酸化元件结合蛋白 1（cytoplasmic polyadenylation element-binding protein 1，CPEB1）在脑胶质瘤组织、T98G 细胞和经 X 射线照射的 T98G 细胞中的表达量。将 miR-183 inhibitor 转染 T98G 细胞后下调 miR-183 表达，经 6 Gy X 射线垂直照射，CCK-8 法、流式细胞术和 WB 法，分别检测 T98G 细胞增殖能力、细胞凋亡率及 BAX 和 Bcl2 蛋白表达量。Targetscan 软件预测和双荧光素酶报告基因实验检测 miR-183 与 CPEB1 的靶向关系。下调 CPEB1 表达后，经 6 Gy X 射线照射，分别用 CCK-8 法、流式细胞术和 WB 法检测 T98G 细胞增殖能力、细胞凋亡率及 BAX 和 Bcl2 蛋白表达量。将 pcDNA-CPEB1 或 CPEB1 siRNA 质粒转染T98G 细胞，分别下调或过表达 CPEB1 后，检测 miR-183 通过 CPEB1 对 T98G 细胞放射敏感性的影响。结果：脑胶质瘤组织和细胞中 miR-183 呈高表达，CPEB1 mRNA 呈低表达。T98G 细胞中 miR-183 的表达量随着 X 射线放射剂量增加而降低（P<0.05），CPEB1 表达量随着 X 射线放射剂量增加而升高（P<0.05）。6 Gy X 射线照射 T98G 细胞后，下调 miR-183 可降低细胞增殖能力、增加细胞凋亡率，而过表达 miR-183 则起到相反作用（P<0.05）。miR-183 靶向 CPEB1 mRNA 且负调控 CPEB1 表达。下调 CPEB1 表达后，经 6 Gy X 射线照射可显著提高 T98G 细胞增殖能力（P<0.05）、降低细胞凋亡率（P<0.05），miR-183 可逆转 CPEB1 过表达对细胞 T98G 放射敏感性的促进作用（P<0.05）。结论：下调 miR-183 的表达能够负调控 CPEB1，从而增强脑胶质瘤细胞的放射敏感性。
目的：探讨 miR-183 对脑胶质瘤细胞放射敏感性的影响。方法：2020 年 10 月至 2021 年 6 月，收集秦皇岛市第一医院 40 例脑胶质瘤组织标本，对 T98G 细胞进行梯度剂量 X 射线（0、2、4、6 Gy）照射。采用 qPCR 检测 miR-183、细胞质多腺苷酸化元件结合蛋白 1（cytoplasmic polyadenylation element-binding protein 1，CPEB1）在脑胶质瘤组织、T98G 细胞和经 X 射线照射的 T98G 细胞中的表达量。将 miR-183 inhibitor 转染 T98G 细胞后下调 miR-183 表达，经 6 Gy X 射线垂直照射，CCK-8 法、流式细胞术和 WB 法，分别检测 T98G 细胞增殖能力、细胞凋亡率及 BAX 和 Bcl2 蛋白表达量。Targetscan 软件预测和双荧光素酶报告基因实验检测 miR-183 与 CPEB1 的靶向关系。下调 CPEB1 表达后，经 6 Gy X 射线照射，分别用 CCK-8 法、流式细胞术和 WB 法检测 T98G 细胞增殖能力、细胞凋亡率及 BAX 和 Bcl2 蛋白表达量。将 pcDNA-CPEB1 或 CPEB1 siRNA 质粒转染T98G 细胞，分别下调或过表达 CPEB1 后，检测 miR-183 通过 CPEB1 对 T98G 细胞放射敏感性的影响。结果：脑胶质瘤组织和细胞中 miR-183 呈高表达，CPEB1 mRNA 呈低表达。T98G 细胞中 miR-183 的表达量随着 X 射线放射剂量增加而降低（P<0.05），CPEB1 表达量随着 X 射线放射剂量增加而升高（P<0.05）。6 Gy X 射线照射 T98G 细胞后，下调 miR-183 可降低细胞增殖能力、增加细胞凋亡率，而过表达 miR-183 则起到相反作用（P<0.05）。miR-183 靶向 CPEB1 mRNA 且负调控 CPEB1 表达。下调 CPEB1 表达后，经 6 Gy X 射线照射可显著提高 T98G 细胞增殖能力（P<0.05）、降低细胞凋亡率（P<0.05），miR-183 可逆转 CPEB1 过表达对细胞 T98G 放射敏感性的促进作用（P<0.05）。结论：下调 miR-183 的表达能够负调控 CPEB1，从而增强脑胶质瘤细胞的放射敏感性。
2021, 28(10):1023-1028.
摘要:
调节性 B 细胞（Breg）是近年来新发现的 B 细胞功能型亚群，其通过分泌白细胞介素-10（IL-10）、白细胞介素-35 （IL-35）和转化生长因子-β（TGF-β）等负向调节因子抑制机体免疫应答，在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用，影响肿瘤的发展、侵袭 和转移。在肝癌、胃癌、乳腺癌、黑色素瘤、卵巢癌、肺癌等多种常见癌中均发现存在具有促癌效应的Breg。Breg和肿瘤的临床分 期、治疗、预后存在一定的相关性。靶向Breg可能成为未来肿瘤免疫治疗的一个新方向。
调节性 B 细胞（Breg）是近年来新发现的 B 细胞功能型亚群，其通过分泌白细胞介素-10（IL-10）、白细胞介素-35 （IL-35）和转化生长因子-β（TGF-β）等负向调节因子抑制机体免疫应答，在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用，影响肿瘤的发展、侵袭 和转移。在肝癌、胃癌、乳腺癌、黑色素瘤、卵巢癌、肺癌等多种常见癌中均发现存在具有促癌效应的Breg。Breg和肿瘤的临床分 期、治疗、预后存在一定的相关性。靶向Breg可能成为未来肿瘤免疫治疗的一个新方向。
2021, 28(10):1029-1036.
摘要:
PD-1/PD-L1 免疫检查点抑制剂（ICI）在单药或联合治疗肝细胞癌（HCC）的临床试验显示出较好的疗效和安全 性，为其临床应用提供有利的科学依据。单药治疗 HCC 的 PD-1/PD-L1 ICI 包括纳武利尤单抗（nivolumab）、帕博利珠单抗 （pembrolizumab）和卡瑞利珠单抗（camrelizumab），主要用于肝癌的二线治疗。虽部分 HCC 患者可以对 PD-1/PD-L1 ICI 单药 治疗产生持久的反应，但总体受益的患者仍然较少。PD-1/D-L1 ICI 联合治疗显示出更好的免疫应答和控制。目前，常用的 联合治疗手段包括与其他类 ICI、靶向药物、放疗、化疗以及介入治疗等联合。与双 ICI 或 ICI 和化疗联合治疗相比，酪氨酸激 酶抑制剂（TKI）和 PD-1/PD-L1 ICI 联合治疗显示出更好的疗效。在安全性方面，联合治疗的不良反应发生率发也高于单药 治疗，且更易出现严重或致死性的不良反应。PD-1/PD-L1 ICI 单药和联合治疗 HBV/HCV 相关 HCC 患者的安全性和有效性 正在研究中，同时接受抗病毒药物治疗患者表现出稳定的治疗应答，但 HBV/HCV 病毒重新激活相关的安全性问题，尚未得 出一致结论。
PD-1/PD-L1 免疫检查点抑制剂（ICI）在单药或联合治疗肝细胞癌（HCC）的临床试验显示出较好的疗效和安全 性，为其临床应用提供有利的科学依据。单药治疗 HCC 的 PD-1/PD-L1 ICI 包括纳武利尤单抗（nivolumab）、帕博利珠单抗 （pembrolizumab）和卡瑞利珠单抗（camrelizumab），主要用于肝癌的二线治疗。虽部分 HCC 患者可以对 PD-1/PD-L1 ICI 单药 治疗产生持久的反应，但总体受益的患者仍然较少。PD-1/D-L1 ICI 联合治疗显示出更好的免疫应答和控制。目前，常用的 联合治疗手段包括与其他类 ICI、靶向药物、放疗、化疗以及介入治疗等联合。与双 ICI 或 ICI 和化疗联合治疗相比，酪氨酸激 酶抑制剂（TKI）和 PD-1/PD-L1 ICI 联合治疗显示出更好的疗效。在安全性方面，联合治疗的不良反应发生率发也高于单药 治疗，且更易出现严重或致死性的不良反应。PD-1/PD-L1 ICI 单药和联合治疗 HBV/HCV 相关 HCC 患者的安全性和有效性 正在研究中，同时接受抗病毒药物治疗患者表现出稳定的治疗应答，但 HBV/HCV 病毒重新激活相关的安全性问题，尚未得 出一致结论。
2021, 28(10):1037-1040.
摘要:
结直肠癌（CRC）分子分型的方法与研究进展主要从基因组学、转录组学和蛋白质组学3个方面展开。依据基因突变 和基因组的细胞遗传学改变进行分型，可以将CRC分为错配修复缺陷导致微卫星不稳定的超突变肿瘤、具有DNA聚合酶epsilon 或Delta 1核酸外切酶结构域突变的超突变肿瘤、具有高频率DNA体细胞拷贝数改变的染色体不稳定性肿瘤等。基于肿瘤的上 皮间质转化、错配修复基因缺陷导致的微卫星不稳定性和细胞增殖相关的高突变频率，可分为MMR缺陷型上皮亚型（A型）、增 殖性上皮亚型（B型）和间充质亚型（C型）。根据基因表达谱的差异分型，可基于临床和组织病理学参数及基因特征、CRC基因表 达谱、全基因组mRNA表达亚型、对表皮生长因子受体靶向药物西妥昔单抗的治疗反应、共识分子等进行CRC亚型分类。基于 生物标志物研究的蛋白质组学分型，可分为亚型A—E等5种不同蛋白质组学亚型。分子分型有助于CRC个体化和精确化的治 疗策略。
结直肠癌（CRC）分子分型的方法与研究进展主要从基因组学、转录组学和蛋白质组学3个方面展开。依据基因突变 和基因组的细胞遗传学改变进行分型，可以将CRC分为错配修复缺陷导致微卫星不稳定的超突变肿瘤、具有DNA聚合酶epsilon 或Delta 1核酸外切酶结构域突变的超突变肿瘤、具有高频率DNA体细胞拷贝数改变的染色体不稳定性肿瘤等。基于肿瘤的上 皮间质转化、错配修复基因缺陷导致的微卫星不稳定性和细胞增殖相关的高突变频率，可分为MMR缺陷型上皮亚型（A型）、增 殖性上皮亚型（B型）和间充质亚型（C型）。根据基因表达谱的差异分型，可基于临床和组织病理学参数及基因特征、CRC基因表 达谱、全基因组mRNA表达亚型、对表皮生长因子受体靶向药物西妥昔单抗的治疗反应、共识分子等进行CRC亚型分类。基于 生物标志物研究的蛋白质组学分型，可分为亚型A—E等5种不同蛋白质组学亚型。分子分型有助于CRC个体化和精确化的治 疗策略。
2021, 28(10):1041-1048.
摘要:
PD-1/PD-L1抑制剂在晚期胃癌（GC）及胃食管交界癌（GEJC）的临床试验中显示出较好的疗效及安全性，为其临床应 用提供了有力的科学依据。单药PD-1/PD-L1抑制剂治疗的疗效欠佳，仅作为后线治疗选择。PD-1/PD-L1抑制剂联合多种治疗 模式能够提高患者的疾病应答率和延长患者生存时间，成为目前GC及GEJC治疗的热点。本文基于最新临床试验结果，对晚期 GC及GEJC的免疫治疗疗效及预测分子进行综述。
PD-1/PD-L1抑制剂在晚期胃癌（GC）及胃食管交界癌（GEJC）的临床试验中显示出较好的疗效及安全性，为其临床应 用提供了有力的科学依据。单药PD-1/PD-L1抑制剂治疗的疗效欠佳，仅作为后线治疗选择。PD-1/PD-L1抑制剂联合多种治疗 模式能够提高患者的疾病应答率和延长患者生存时间，成为目前GC及GEJC治疗的热点。本文基于最新临床试验结果，对晚期 GC及GEJC的免疫治疗疗效及预测分子进行综述。
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- 《中国肿瘤生物治疗杂志》
- 1994年创刊
- 主办单位：中国免疫学会、中国抗癌学会
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- 电子邮箱：cjcb@biother.cn
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- 刊号：ISSN 1007-385X
- CN 31-1725/R
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