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专家论坛
免疫类器官在肿瘤免疫研究中的应用与挑战
王雪婷,高春记,张斌
2024,31(8):743-751
, DOI:
10.3872/j.issn.1007-385X.2024.08.001
[摘要]
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64
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[PDF 1.51 M]
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651
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摘要:
免疫治疗作为一种快速发展的治疗手段,使肿瘤治疗发生了革命性的变化,也使肿瘤免疫学研究领域重新焕发生机。 免疫类器官因其能重建肿瘤免疫微环境,模拟免疫细胞的应答机制和相互作用而成为强有力的工具,在肿瘤免疫研究中得到了 广泛的应用。免疫器官来源的免疫类器官,肿瘤类器官与免疫细胞共培养的新型免疫类器官模型为肿瘤免疫学研究提供了新的 途径,可应用于肿瘤发生发展机制研究、药物筛选、研发肿瘤疫苗及指导个体化精准治疗等多个领域。本文总结免疫类器官的培 养方法与现状,探讨了免疫类器官在肿瘤免疫中的广泛应用,对免疫类器官目前存在的不足进行了初步分析并对未来的发展方 向进行了展望。
标准与指南
“载药囊泡化肿瘤靶向治疗术”临床应用专家共识
刘艳粉,秦国慧,王 丹,黄 波,张 毅
2024,31(8):752-758
, DOI:
10.3872/j.issn.1007-385X.2024.08.002
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[PDF 806.01 K]
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摘要:
随着精准医疗的快速发展,细胞外囊泡在肿瘤等疾病的诊断和转化应用中展现出巨大潜力。“载药囊泡化肿瘤靶向治 疗术”是中国原创的新型肿瘤免疫治疗技术,其以肿瘤细胞来源的微囊泡作为载体,包裹或负载临床常用小分子化疗药物,通过 药物靶向递送、趋化和激活中性粒细胞、逆转巨噬细胞极化表型及促进肿瘤抗原提呈等多重作用机制实现对肿瘤细胞的有效杀 伤。历经十余年的抗肿瘤机制探究、临床前评估及临床试验,该技术已成功完成临床转化,获批临床应用。为进一步推动“载药 囊泡化肿瘤靶向治疗术”在临床的规范和科学应用,中国免疫学会肿瘤免疫与生物治疗专业委员会和中国抗癌协会肿瘤生物治 疗专业委员会联合组织细胞外囊泡及肿瘤免疫治疗领域的技术和临床专家,经过多次商讨与修订,最终撰写了《“载药囊泡化肿 瘤靶向治疗术”临床应用专家共识》。本共识就“载药囊泡化肿瘤靶向治疗术”在肿瘤治疗领域的研究和应用进行了介绍,并对该 技术面临的挑战及未来发展方向进行了展望,旨在为其临床合理使用提供建议及参考。
基础研究
单细胞测序揭示Ly6E分子对乳腺癌4T1细胞移植瘤微环境中DC浸润 及功能的抑制作用
吴越,陈燚婷,朱艳阳,兰海林,周琳琳,张秋玉
2024,31(8):759-768
, DOI:
10.3872/j.issn.1007-385X.2024.08.003
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41
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[PDF 5.16 M]
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623
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摘要:
目的:本研究利用单细胞RNA测序分析技术(scRNA-seq)初步探索乳腺癌4T1细胞表达淋巴细胞抗原6复合物E(Ly6E) 调控肿瘤免疫微环境(TIME)的潜在机制。方法:利用CRISPR-Cas9技术构建Ly6e基因敲除小鼠乳腺癌4T1细胞(Ly6E-KO),观 察其和野生型细胞(Ly6E-WT)体外增殖和体内生长能力的差异。流式细胞术分选两类肿瘤组织中的CD45阳性细胞,再进行scRNAseq分析。对于测序结果,首先利用Seurat软件包筛选差异表达基因谱,根据标记基因进行注释;再利用Cellchat和Monocle2软件 分析细胞互作关系和特定免疫细胞的演化轨迹。结果:与Ly6E-WT 相比,Ly6E-KO体外增殖能力无显著差异,但体内生长能 力显著降低(P<0.001)。ScRNA-seq分析显示,Ly6E-KO移植瘤浸润DC比例显著高于Ly6E-WT,且DC处于更加活跃的增殖和分 裂状态;三种DC亚群(pDC、cDC1和cDC3)与T细胞均存在显著的互作关系。同时发现,Ly6E-KO肿瘤中浸润T淋巴细胞增殖、活 化及效应相关的基因表达水平均升高,提示Ly6E-KO具有更强抗肿瘤能力。最后,本研究对人类乳腺癌队列的scRNA-seq数据进 行了分析,进一步证实了上述发现。结论:肿瘤细胞Ly6e基因敲除后可通过增加TIME中DC活化及浸润,继而增强机体抗肿瘤免 疫应答。
牙龈卟啉单胞菌通过GARP促进TGF-β/SMAD轴介导食管鳞状细胞癌 细胞的上皮间质转化
张升华,杨静怡,祁春晖,乔亮,高社干,齐义 军
2024,31(8):769-776
, DOI:
10.3872/j.issn.1007-385X.2024.08.004
[摘要]
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49
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[PDF 5.02 M]
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620
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摘要:
目的:阐明牙龈卟啉单胞菌(Pg)诱导食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞发生上皮间质转化(EMT)的分子机制。方法: KEGG分析Pg诱导的ESCC差异表达基因富集的生物学通路,WB和/或免疫荧光法检测Pg诱导的ESCC细胞中糖蛋白A重复优 势蛋白(GARP)、TGF-β、pSMAD/SMAD、Snail、Oct4和EMT相关分子表达的变化,ELISA检测TGF-β1水平的变化,免疫组织化 学法检测ESCC组织中GARP和TGF-β1的表达规律,Transwell实验和动物实验验证Pg对ESCC的促进作用。结果: ESCC细胞 感染Pg后,TGF-β、Hippo、PI3K/Akt 等信号通路被激活 ;Pg 感染刺激 ESCC 细胞分泌总 TGF-β1和活性TFG-β1的水平升高 (均P<0.01),使SMAD2/3磷酸化并发生核转位,诱导N-cadherin、Snail、Oct4等蛋白表达升高、E-cadherin蛋白表达降低,由此促进 ESCC 细胞的迁移、侵袭和裸鼠皮下移植瘤的生长(均 P<0.01)。在 ESCC 细胞中沉默 GARP 表达后,逆转了 Pg 所诱导的上述 ESCC细胞表型变化。Pg丰度高的ESCC 组织中 TGF- β1 和 GARP蛋白表达高于低丰度的ESCC组织,且Pg丰度与TGF-β1、 GARP表达存在正向关联(P=0.001 5)。结论:Pg通过GARP激活TGF-β/SMAD轴促进ESCC细胞发生EMT,进而促进ESCC细 胞的迁移、侵袭和生长,清除Pg或阻断TGF-β信号转导则可阻断上述Pg对ESCC的促进作用。
靶向性CPI-444载药纳米微粒的制备及其对T细胞活性和抗肿瘤效应的 影响
陈明水,李洁羽,王玲,周智锋,张麟腾
2024,31(8):777-785
, DOI:
10.3872/j.issn.1007-385X.2024.08.005
[摘要]
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[PDF 4.41 M]
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摘要:
目的:制备并表征包载CPI-444并偶联CD8抗体的纳米微粒(CNP/αCD8),探讨其对CD8+ T细胞活化、增殖和抗肿瘤 作用的影响。方法: 采用复乳溶剂蒸发法和EDC/NHS法制备包载腺苷受体A2A(A2AR)特异性拮抗剂CPI-444(C)或香豆素6 (C6)荧光素的纳米微粒并分别在其表面偶联CD8抗体,制得CNP/αCD8和C6NP/αCD8。扫描电镜和NanoPlus粒度测定仪表征 纳米微粒形态和粒径,液相色谱与串联质谱联用(LC-MS/MS)法和离心法测定纳米微粒的载药量和药物释放情况,荧光显微镜和 流式细胞仪检测CD8+ T细胞内化C6NP/αCD8的情况,流式细胞仪、ELISA和LDH法检测CNP/αCD8对CD8+ T细胞增殖、活化、 细胞毒活性和杀瘤能力的影响。结果: CNP/αCD8纳米微粒为圆形、粒径约150 nm,能有效包载CPI-444和偶联CD8抗体,药物 包封率和CD8抗体偶联效率分别约为60%和53.4%;CNP/αCD8纳米微粒具有良好稳定性,能被CD8+ T细胞内化,抑制A2AR分 子表达。生物学功能实验显示,CNP/αCD8增强CD8+ T细胞的增殖能力、促进T细胞活化、分泌细胞因子及产生颗粒酶B和穿孔 素,并增强CD8+ T细胞杀伤肿瘤细胞的能力。结论: CNP/αCD8纳米微粒能显著增强CD8+ T细胞免疫效应功能,其增强CD8+ T 细胞功能可能是通过抑制A2AR分子的表达起作用。
过氧化物酶体膜蛋白4通过细胞外信号调节激酶1/2信号通路促进肝细 胞癌细胞的上皮间质转化
李巍,徐梓山,马柯,张静雨,胡晓云,贺国洋
2024,31(8):786-795
, DOI:
10.3872/j.issn.1007-385X.2024.08.006
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37
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[PDF 8.79 M]
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626
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摘要:
目的:探讨过氧化物酶体膜蛋白4(PXMP4)对肝细胞癌(HCC)细胞迁移和侵袭及上皮间质转化(EMT)进程的影响。 方法:采用生物信息学和免疫组织化学方法分析 HCC 组织中 PXMP4 的表达,分析其与患者临床病理特征的相关性。在 HCCLM3和MHCC97H细胞中干扰PXMP4,在Huh7和MHCC97L细胞中过表达PXMP4,利用WB和qPCR法验证干扰/过表达 效率。利用CCK-8、划痕愈合实验和Transwell侵袭实验检测干扰/过表达PXMP4对HCC细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,采用 WB法检测干扰/过表达PXMP4或0、5、10和20 μmol/L U0126处理对HCC细胞中N-cadherin、E-cadherin、vimentin、细胞外信号调 节激酶(ERK)、p-ERK表达的影响。结果:生物信息学和免疫组织化学分析显示,HCC组织中PXMP4呈高表达(P<0.05)。临床 病理分析发现,PXMP4的表达与肿瘤分化程度有关联(P<0.05)。在HCC细胞中,干扰PXMP4后抑制细胞增殖、侵袭和EMT进 程(P<0.05);反之,过表达PXMP4后促进HCC细胞增殖、侵袭及EMT进程(P<0.05)。此外,PXMP4通过激活ERK1/2信号通路 促进HCC细胞EMT进程,U0126处理同样能够抑制HCC细胞EMT进程。结论:PXMP4在HCC组织中呈高表达且与HCC细胞 分化有关联,PXMP4通过激活ERK1/2信号通路促进HCC细胞EMT进程。
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骨髓增生异常综合征去甲基化药物治疗的研究进展
王琳
,
许小平
2012,19(5):550-555
, DOI:
10.3872/j.issn.1007-385X.2012.5.018
[摘要]
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2443
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[PDF 236.31 K]
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摘要:
骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)的发病机制涉及多阶段、多因素,基因改变与表观遗传修饰可能共同参与了这一过程。DNA甲基化是表观遗传学中一种最为重要的修饰,MDS患者常表现为总体DNA高甲基化。使用DNA甲基转移酶(DNA methyltransferase,DNMT)抑制剂降低总体甲基化水平,在MDS患者中取得了富有成效的临床反应及血液学改善。DNMT抑制剂可分为两类:5-氮杂胞苷(5-azacytidine, 5-Aza-CdR)、地西他滨(5-Aza-2-deoxycytidine, decitabine)等核苷和核苷衍生物类抑制剂,它们可提高MDS患者的临床完全反应率、部分反应率及血液学改善,但缓解率、疗效尚不够令人满意;肼苯哒嗪等非核苷类抑制剂。非核苷类抑制剂与丙戊酸镁联合应用治疗MDS获得成功,为MDS去甲基化治疗药物的研究开启了一种新思路。
肿瘤免疫细胞治疗的现状及展望
郭振红
,
曹雪涛
2016,23(2):149-160
, DOI:
10.3872/j.issn.1007-385X.2016.02.001
[摘要]
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摘要:
肿瘤免疫细胞治疗近年来因其疗效显著而备受瞩目。免疫细胞,包括T细胞、NK细胞和DC在抗肿瘤免疫应答以及肿瘤免疫治疗中发挥了重要作用。其中,嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)修饰T细胞(CAR-T)技术和逆转肿瘤免疫抑制功能的CTLA-4和PD-1/PD-L1等免疫检查点抑制剂疗法分别在血液肿瘤及黑素瘤等实体肿瘤治疗中取得了令人振奋的效果,如何进一步提高疗效、增加适应性肿瘤病种并控制其免疫相关的不良反应成为日后研究重点;NK 细胞也将利用CAR技术和免疫检查点抑制剂进一步增强其在肿瘤治疗中的作用;DC作为第一个被FDA批准的治疗性肿瘤疫苗,在证明其安全无毒副作用的基础上,如何提高疗效成为关注热点。本文结合近年来肿瘤免疫细胞治疗的进展及该领域中亟需解决的问题作一分析与展望。
前列腺癌内分泌治疗及其全程管理
师菲
,
夏术阶
2018,25(1):23-27
, DOI:
10.3872/j.issn.1007-385X.2018.01.004
[摘要]
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990
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摘要:
前列腺癌已成为我国男性常见病之一,内分泌治疗在前列腺癌(尤其是晚期前列腺癌)治疗中举足轻重,但在临床应用中出现的一系列分歧并没有解决。如何相对统一认识,进行合理的前列腺癌内分泌治疗的全程管理,让患者获得最佳疗效显得尤为重要。本文依据国内外指南以及临床试验结果,对目前前列腺癌内分泌治疗的一系列问题,如治疗时机、治疗方案、患者选择、预后随访等作了详细总结及分析。
包载TIMP-1重组腺病毒微球的制备及其对肝癌细胞增殖的抑制
夏 冬
,
吴 斌
,
梁建群
,
余少鸿
,
徐 亮
2010,17(1):57-61
, DOI:
10.3872/j.issn.1007-385X.2010.1.011
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摘要:
目的:制备携带人基质金属蛋白酶组织抑制因子 1(tissue inhibitors of metalloproteinase 1,TIMP 1)的重组腺病毒乳酸聚乙烯醇(poly DL lactide poly,PELA)微球,探讨其对HepG2肝癌细胞增殖的影响。方法:采用溶剂挥发法双乳液体系,以可降解的生物材料PELA包被携带TIMP 1基因的重组腺病毒制成微球,测定其粒径、载病毒量、包封率及释放规律。重组腺病毒微球感染HepG2细胞,荧光显微镜观测感染效率,透射电镜观测超微结构,半定量RT PCR检测TIMP 1 mRNA表达;MTT法检测HepG2细胞增殖。结果:成功构建包载TIMP 1重组腺病毒的PELA微球,直径约1.965 μm,包封率为60%,载病毒率为10.5×108efu/mg,在120 h内释放病毒量接近60%,总的释放时间长于240 h。空白微球无毒性PELA病毒微球感染HepG2细胞后,细胞稳定表达TIMP 1 mRNA;对HepG2细胞的增殖有明显抑制作用,抑制率表达47%。结论:包载TIMP 1重组腺病毒的PELA微球可抑制肝癌HepG2细胞的增殖,为化学高分子载体运载基因治疗肝癌提供了实验依据。
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